Los resultados de un método de detección usando cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) son confirmados, de rutina, mediante isoelectroenfoque (IEF) para determinar la presencia de hemoglobinopatías anormales en la sangre del recién nacido.

En un estudio, realizado por el Laboratorio de Cribado de Recién Nacidos de los West Midlands (Hospital Pediátrico de Birmingham, Reino Unido) se evaluó un sistema de electroforesis capilar como un posible reemplazo para otros métodos. Con esta técnica, las moléculas cargadas son separadas por su movilidad electroforética en un buffer alcalino con un pH específico. La separación se produce también en función del pH de los electrolitos y el flujo electro-osmótico. Las hemoglobinas individuales se separan mediante capilares de sílice y amortiguadores proporcionados por los fabricantes. Estas hemoglobinas son detectadas a una longitud de onda de 415 nm. Los electroforetogramas resultantes son evaluados en la pantalla para detectar anomalías en los patrones y un software que identifica los patrones normales y patológicos.

Se analizaron trescientos cuarenta y siete muestras de sangre seca usando, en primer lugar, el método de HPLC de detección para recién nacidos, VARIANT, (Vnbs) (Bio-Rad Laboratories Ltd.; Hertfordshire, Reino Unido). Cualquier hemoglobina anormal encontrada fue confirmada con el kit de Resolve IEF, suministrado por Perkin-Elmer (Seer Green, Reino Unido; www.perkinelmer.com). Estas muestras fueron analizadas, luego, utilizando el sistema Capillary Neonat Hemoglobin FAST (Sebia Norcross, GA, EUA) para comparar la identidad de los picos y en una selección el porcentaje de las áreas de integración.

La preparación de la muestra, recomendada por Sebia tuvo que ser modificada para permitir que las pruebas fuesen más comparables con los procesos actuales. Se compararon los porcentajes de hemoglobinas calculados a partir de la integración de las áreas bajo los picos, entre los sistemas Bio-Rad Vnbs HPLC y Sebia Capillarys Neonat Hemoglobina FAST. Entre las 347 muestras de sangre seca analizadas tanto por HPLC como por electroforesis capilar, no hubo diferencias significativas. El sistema Sebia Capillarys Neonat Haemoglobin FAST puede ser utilizado para detectar, en los recién nacidos, la enfermedad de células falciformes con éxito en muestras de sangre seca recolectadas para la detección en los recién nacido con una identificación positiva de la muestra y trazabilidad plenas. El resultado de los análisis de las muestras de recién nacidos se simplifica por múltiples factores.

El sistema Capillary 2 Neonat Fast proporciona resultados rápidos, sin picos extraños, para los recién nacido. Los resultados de los recién nacidos son codificados automáticamente con un color verde, para normal, o rojo para anormal, con el fin de distinguir con facilidad los resultados anormales, que también se pueden ordenar e imprimir. Todos los resultados, de los recién nacidos, se almacenan electrónicamente, están disponibles con facilidad, y son trazables de principio a fin - la identificación real de la muestra positiva. El estudio fue publicado en la edición de octubre de 2011, de la revista International Journal of Laboratory Hematology.

Enlaces relacionados:

Birmingham Children’s Hospital

Bio-Rad

Sebia