Los tubos de recolección influyen sobre los estudios metabolómicos dirigidos

El plasma y el suero son las matrices más utilizadas en los estudios clínicos. Sin embargo, es probable que se observe cierta variabilidad en las concentraciones absolutas de los metabolitos en estas matrices de los tubos de recolección.

La selección de la matriz correcta para el análisis bioquímico es de suma importancia para evitar un diagnóstico inadecuado. Los tubos de extracción de sangre a menudo son una variable poco reconocida en la fase preanalítica de los estudios clínicos y, por lo tanto, es importante evaluar la influencia de estas matrices durante el análisis metabólico.

Un equipo internacional de científicos que trabajan con el Instituto de Biomedicina (Eurac Research, Bolzano, Italia) inscribió a un total de 40 individuos sanos independientes que fueron seleccionados con una edad inferior a 35 años y asignados al grupo "joven" . Los otros 40 individuos sanos independientes se seleccionaron con una edad superior a 60 años y se asignaron al grupo de "ancianos". La sangre se recolectó en el centro de reclutamiento después del ayuno nocturno, y se tomó temprano en la mañana dentro de un intervalo breve de tiempo.

Los tubos de recolección al vacío Vacuette para suero, con EDTA y citrato, fueron proporcionados por Greiner Bio-One (Kremsmünster, Austria). Para la espectrometría de masas- cromatografía líquida, se realizó un análisis dirigido utilizando el kit Biocrates AbsoluteIDQ p180 (Innsbruck, Austria) con un instrumento de cromatografía líquida de desempeño ultraalto (UHPLC) (Agilent 1290, Agilent Technologies, Santa Clara, CA , EUA) acoplado a un espectrómetro de masas Q-Trap (MS) (QTRAP 6500, Sciex, Redwood City, CA, EUA).

El equipo analizó 189 metabolitos utilizando el mismo protocolo para la metabolómica cuantitativa dirigida. Los niveles de concentración fueron más altos en suero que en citrato y EDTA, en particular para los aminoácidos y las aminas biogénicas. Para los aminoácidos, el valor promedio de la diferencia relativa fue 7% mayor en suero que en EDTA y 6% mayor en suero que en citrato. Para las aminas biogénicas, el valor promedio de la diferencia relativa fue 11% mayor en suero que en EDTA y 15% mayor en suero que en citrato. Los investigadores también demostraron que los tubos vacutainer sin usar, con EDTA, contienen una cantidad significativa de sarcosina. Finalmente, compararon el metaboloma de los individuos jóvenes con el de los individuos ancianos y encontraron que el mayor número de metabolitos que cambiaban significativamente con la edad, se podían detectar en el suero.

Los autores concluyeron que las muestras de suero proporcionan una mayor sensibilidad para los estudios de descubrimiento de biomarcadores. Debido a la presencia de una cantidad espuria de sarcosina en los tubos al vacío con EDTA, el plasma con EDTA no es una muestra adecuada para los estudios que requieren una cuantificación precisa de la sarcosina. El estudio fue publicado en línea el 13 de agosto de 2018 en la revista Clínica Chimica Acta.

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Eurac Research
Greiner Bio-One
Biocrates
Agilent Technologies
Sciex