Respuestas de anticuerpos específicos contra el SARS-CoV-2 en los pacientes con COVID-19

La rápida identificación de la etiología y el intercambio de las secuencias genéticas del virus, seguido de los esfuerzos de colaboración internacional iniciados debido a la aparición del SARS-CoV-2 han llevado a la rápida disponibilidad de ensayos de diagnóstico de PCR en tiempo real que respaldan la verificación de casos y el seguimiento del brote.

Los ensayos serológicos validados son cruciales para el rastreo de los contactos de los pacientes, identificar los huéspedes del reservorio viral y para estudios epidemiológicos. Se necesitan, con urgencia, estudios epidemiológicos para ayudar a descubrir la carga de la enfermedad, en particular, la tasa de infecciones asintomáticas y para obtener mejores estimaciones sobre la morbilidad y la mortalidad.

Un equipo internacional de científicos que trabaja con el Centro Médico Erasmus (Rotterdam, Países Bajos) desarrolló ensayos serológicos para la detección de anticuerpos neutralizantes de SARS-CoV-2, específicos contra la espiga y las nucleocápsides. Utilizaron muestras de suero de pacientes con infecciones confirmadas por la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) del SARS-CoV-2, otros coronavirus u otras infecciones patógenas respiratorias, y validaron y ensayaron varios antígenos con diferentes ensayos inmunosorbentes ligados a enzimas internos y comerciales (ELISA).

Los investigadores realizaron pruebas ELISA anti-SARS-CoV-2, IgG e IgA, utilizando versiones beta de dos kits comerciales (EUROIMMUN Medizinische Labordiagnostika AG, Lübeck, Alemania). Realizaron los ELISA internos recubriendo placas ELISA de microtitulación de 96 pozos con antígenos de espiga producidos internamente (S o S1 de SARS-CoV-2, SARS-CoV o MERS-CoV; o SARS-CoV-2 S1A, o Proteínas RBD) o SARS-N en PBS durante la noche a 4ºC. Después del procesamiento, se midió la absorbancia de cada muestra a 450 nm.

Los científicos demostraron que la mayoría de los individuos infectados por SARS-CoV-2 confirmados por PCR seroconvirtieron, como lo revelaron los ELISA internos sensibles y específicos. Descubrieron que los ELISA S1 IgG o IgA comerciales tenían menor especificidad, mientras que la sensibilidad variaba entre los dos, con IgA mostrando una mayor sensibilidad. Compararon el desempeño de los diferentes ELISA para la detección de anticuerpos entre pacientes con COVID-19 confirmados por PCR con el del ensayo de neutralización de reducción de placa (PRNT), como el estándar de oro para la serología de CoV. La prueba PRNT50 se correlacionó fuertemente con los diferentes ELISA, con la prueba para la IgA comercial mostrando la correlación más fuerte seguida por los ELISA para S y N, que indican su capacidad para detectar anticuerpos específicos de SARS-CoV-2.

Los autores concluyeron que, en general, los ensayos validados descritos aquí pueden ser instrumentales para la detección de anticuerpos específicos contra el SARS-CoV-2, para estudios de diagnóstico, seroepidemiológicos y de evaluación de vacunas. El estudio fue publicado el 20 de marzo de 2020 en la revista de pre-publicaciones medRxiv.

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EUROIMMUN