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Pruebas de disociación de la urea reducen los falsos positivos de la prueba de IgM para el SARS-CoV-2

Por el equipo editorial de LabMedica en español
Actualizado el 29 Apr 2020
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Imagen: El lector de microplacas PHOMO: el diseño óptico sofisticado combinado con el sistema de transporte de placas exacto permite un escaneo de alta resolución (29 puntos por pozo) para permitir ensayos de aglutinación (Fotografía cortesía de Autobio Diagnostics Co).
Imagen: El lector de microplacas PHOMO: el diseño óptico sofisticado combinado con el sistema de transporte de placas exacto permite un escaneo de alta resolución (29 puntos por pozo) para permitir ensayos de aglutinación (Fotografía cortesía de Autobio Diagnostics Co).
En la actualidad, el diagnóstico de COVID-19 se basa principalmente en la investigación de la historia epidemiológica, las pruebas de laboratorio y los exámenes de radiología del tórax. Entre estos exámenes, la detección de ácido nucleico del SARS-CoV-2 es la evidencia directa para el diagnóstico de COVID-19.

La detección de IgM e IgG específicas de suero, especialmente de la primera, se usa de manera rutinaria en los laboratorios clínicos para evaluar la infección de fase aguda de patógenos en el suero. En muchas infecciones, la IgM puede detectarse apenas una semana después de la infección. Cuando el nivel de IgM alcanza el límite de detección del kit de análisis, la detección de IgM puede evitar resultados falsos negativos debido a la toma de las muestras.

Los científicos del laboratorio médico del Hospital Afiliado de la Facultad de Medicina del Norte de Sichuan (Nanchong, PR China), utilizaron el ensayo de inmunocromatografía de oro (GICA) y el ensayo de inmunosorbente ligado a enzimas (ELISA) para detectar la IgM para el SARS-CoV-2 en 86 muestras de suero, incluidos cinco sueros positivos para la IgM del virus de la influenza A (gripe A), cinco sueros positivos para la IgM del virus de la influenza B (gripe B), cinco sueros positivos para para la IgM del Mycoplasma pneumoniae, cinco sueros positivos para para la IgM contra Legionella pneumophila, seis sueros de pacientes con infección por VIH, 36 sueros positivos al factor reumatoide IgM (RF-IgM), cinco sueros de pacientes hipertensos, cinco sueros de pacientes con diabetes mellitus y 14 sueros de pacientes con la nueva enfermedad por infección por coronavirus (COVID-19).

Se analizaron los factores de interferencia que causan reactividad falsa positiva en los dos métodos, y se empleó la prueba de disociación de urea para disociar el suero IgM positivo de SARS-CoV-2 usando la mejor concentración de disociación. La IgM contra la gripe A y B, M. pneumoniae y L. pneumophila se detectaron mediante un ensayo de inmunofluorescencia indirecta (kit de detección conjunto 8 del tracto respiratorio, EUROIMMUN, Inc., Lübeck, Alemania). El factor reumatoide (RF-IgM) se detectó mediante un ensayo de nefelometría de frecuencia (IMMAGE800, Beckman Coulter, Inc., Brea, CA, EUA). El VIH combinado PT se detectó mediante un ensayo de electroquimioluminiscencia (Cobas E602, Roche, Mannheim, Alemania).

Se utilizaron GICA y ELISA para la detección de IgM de SARS-CoV-2 (kit proporcionado por Beijing Hotgen Biotechnology Co., Beijing, China). La densidad óptica en placas ELISA se midió usando un lector de microplacas PHOMO (Autobio Diagnostics Co., Zhengzhou, China). También se realizaron pruebas GICA y ELISA con disociación de urea.

El equipo informó que tanto los análisis GICA como ELISA detectaron la IgM positiva para el SARS-CoV-2 en 22 sueros RF-IgM positivos de nivel medio-alto y en los 14 sueros de pacientes con COVID-19. Los otros 50 sueros fueron negativos. Cuando la concentración de disociación de urea fue de 6 mol/L, la IgM de SARS-CoV-2 fue positiva en un suero de RF-IgM positivo de nivel medio-alto y en las 14 muestras de COVID-19 detectadas usando GICA. Cuando la concentración de disociación de urea fue de 4 mol/L y el índice de avidez (AI) inferior a 0,371 se ajustó a negativo, los resultados de la prueba fueron positivos para el SARS-CoV-2 en 3 sueros RF-IgM positivos de nivel medio-alto, así como en los 14 sueros COVID-19 detectados mediante ELISA.

Los autores concluyeron que un nivel medio-alto de RF-IgM podría conducir a una reactividad falsa positiva de la IgM de SARS-CoV-2, detectada mediante GICA y ELISA, y las pruebas de disociación de urea serían útiles para reducir los resultados falsos positivos de IgM en los pacientes con SARS-CoV- 2. El estudio fue publicado el 10 de abril de 2020 en la revista Journal of Clinical Microbiology.

Enlace relacionado:
Hospital Afiliado de la Facultad de Medicina del Norte de Sichuan
Beckman Coulter
Roche
Beijing Hotgen Biotechnology
Autobio Diagnostics Co


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