Temperatura afecta expresión de antígenos leucocitarios superficiales

Los análisis por citometría de flujo de los antígenos superficiales de los leucocitos han sido utilizados para caracterizar los procesos infecciosos y sépticos en los pacientes.

Los factores que afectan la inmunofenotipificación de los leucocitos incluyen la temperatura de muestreo y procesamiento, el anticoagulante usado y la temperatura de conservación de la muestra de sangre.

Científicos de la Universidad de Oulu (Oulu, Finlandia), investigaron los posibles efectos del anticoagulante, la toma de la muestra, el almacenamiento y la temperatura de procesamiento y el tiempo de almacenamiento de la muestra, sobre la expresión de varios antígenos superficiales de los leucocitos. Recogieron la sangre de cinco pacientes del sexo masculino, con edades entre 44 a 68 años, con sepsis grave que requerían cuidados intensivos y cinco miembros del personal de salud (dos hombres y tres mujeres, con edades entre 22 y 62 años). En este estudio, los pacientes y los voluntarios sanos fueron combinados en una sola población de estudio.

La sangre fue recolectada en tubos de vacío de silicona que contenían dextrosa citrato ácido (ACD) o heparina sódica como anticoagulante y fueron conservados a 4°C, o a temperatura ambiente (TA). Las alícuotas de las muestras de sangre fueron incubadas con anticuerpos diferentes a diferentes temperaturas y tiempos, y analizadas en un citómetro de flujo FACSCalibur (BD Bioscience, San José, California, EUA). Los antígenos superficiales de interés fueron el clúster neutrofílico de diferenciación (CD) 11b y CD64, monocítico CD11b, CD14, CD40, CD64, CD80 y el antígeno leucocitario humano, HLA-DR, y los linfocíticos (por separado en las células T, CD4+ y CD8+, células B , y las células asesinas naturales.

La intensidad de fluorescencia fue superior a temperatura ambiente que a 4°C. Durante el almacenamiento las intensidades aumentaron a temperatura ambiente, pero a 4°C sólo hubo cambios menores. Los efectos fueron similares con ambos anticoagulantes estudiados. Los autores concluyeron que el estudio muestra de forma cuantitativa que el almacenamiento de las muestras de sangre a temperatura ambiente puede tener efectos pronunciados sobre las intensidades de varios antígenos de la superficie de los leucocitos, lo que es de interés en los estudios de activación de los leucocitos, como en los pacientes con sepsis. En consecuencia, recomendaron que el análisis de citometría de flujo de las expresiones de los antígenos superficiales de los leucocitos sea realizado a temperatura de 4°C durante todo el proceso y en un plazo de no más de seis horas. El estudio fue publicado en línea el 15 de marzo 2011, en la revista Journal of Clinical Laboratory Analysis.

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University of Oulu
BD Bioscience