Microarray detecta anticuerpos virales y cuantifica la proteína C-reactiva

Un método de inmovilización para un microarray basado en un inmunoanálisis, para un método diagnóstico serológico, ha sido combinado con un análisis cuantitativo para la proteína C-reactiva (PCR).

Los microarrays se utilizan ampliamente en las pruebas de hibridización de ADN y ácido ribonucleico (ARN), de alto rendimiento y fueron adoptadas recientemente para estudios de interacción de proteínas y pequeñas moléculas, en el diagnóstico clínico.

Científicos de la Universidad de Finlandia Oriental (Kuopio, Finlandia) utilizaron un péptido sintético del virus de inmunodeficiencia humana 1 (VIH-1), una proteína recombinante del nucleocápside de Puumala hantavirus (PUUV), y preparaciones purificadas de virus de Sindbis y adenovirus como antígenos para la detección de anticuerpos específicos del virus. Ellos también utilizaron un anticuerpo monoclonal anti-CRP para la detección de antígeno. El microarray se basó en inmunoensayos enzimáticos convencionales en placas regulares de poliestireno de 96 pozos y densitometría de resultados fotografiados.

Los resultados de PCR fueron concordantes en el intervalo de concentración de 0,5 mg/L a 150 mg/L con dos ensayos de PCR disponible comercialmente, el ensayo rápido ReaScan (Reagena Internacional; Toivala, Finlandia) y el analizador Cobas 6000 (Roche, Basilea, Suiza). Los antígenos peptídicos y recombinantes funcionaron bien, mientras que los antígenos de virus enteros dieron resultados discrepantes en sólo una de 23 muestras del método de referencia analizado con sueros humanos con diferentes respuestas de anticuerpos.

Había una concordancia del 100% del péptido del VIH-1 y las pruebas recombinante para el PUUV con el método de referencia y 96% de concordancia de las pruebas de virus de Sindbis y adenovirus con un único resultado discordante positivo y negativo para ambos virus.

Los autores concluyeron que sus resultados indican que las placas de microtitulación proporcionan una plataforma prometedora para el desarrollo adicional de los microarrays para la detección paralela de anticuerpos y antígenos. El método de recubrimiento utilizado en este estudio fue versátil tanto para anticuerpos como antígenos de diferentes propiedades fisicoquímicas, tales como péptidos, proteínas, y preparaciones de virus enteros. El estudio fue publicado el 4 de diciembre de 2012, en la revista Diagnostic Microbiology and Infectious Disease.

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University of Eastern Finland

Reagena International

Roche