Inmunoanálisis molecular diagnostica la mieloidosis

La mieloidosis es causada por la bacteria Gram-negativa, Burkholderia pseudomallei, para la cual la prueba estándar es el crecimiento en medios de cultivo microbiológicos, lo cual requiere por lo menos 3 a 4 días, para obtener un resultado, dificultando el tratamiento exitoso de la enfermedad aguda.

Cuando la seroprevalencia de anticuerpos contra B. pseudomallei es relativamente baja, la serología es una adición potencialmente favorable al cultivo para el diagnóstico de melioidosis y la serología sería muy eficaz en el diagnóstico de los viajeros y el personal militar que regresan de zonas endémicas tropicales.

Los científicos de la Universidad James Cook (Douglas, Australia) desarrollaron un ensayo ELISA y una reacción en cadena de inmunopolimerasa cuantitativa (PCR), capaz de detectar anticuerpos específicos para la melioidosis. Los científicos demostraron su validez con el ensayo de hemaglutinación indirecta (IHA) en sueros negativos de pacientes con melioidosis. Un total de 10 muestras de suero de tres pacientes IHA-positivos y tres IHA-negativos para melioidosis fueron analizadas junto con los sueros de los seis controles sanos.

Para verificar los análisis, los científicos utilizaron varias técnicas que incluyeron inmunotransferencia, ELISA indirecto con proteína G conjugada con peroxidasa e inmuno-PCR con la sustancia de utilización indirecta terminal (TUS) - replicación del ADN de sitios de terminación (Ter)-lock. Los dos últimos sistemas se basan en la detección de inmunoglobulina G (IgG), por la proteína G, conjugada a un sistema de generación de señal que consta de la lectura de la actividad enzimática de la peroxidasa o de una PCR cuantitativa (qIPCR) en el caso de Tus y la sonda ADN TT-lock-T. Todos los sueros de los pacientes, incluidos los recogidos al momento de la presentación y en las recolecciones para seguimiento posterior, reaccionaron contra la fracción antigénica de B. pseudomallei tanto en el formato ELISA con G-peroxidasa y el formato TT-lock qIPCR. Unos sueros individuales de control negativo de seis controles sanos no reaccionaron en contra de la fracción antigénica de B. pseudomallei en ninguno de los ensayos.

Los autores concluyeron que aunque el sistema indirecto TT-lock qIPCR es ligeramente más lento que el formato ELISA, requiere la menor cantidad de suero y sería ventajoso cuando son necesarios múltiples ensayos para la confirmación de la enfermedad. La capacidad para detectar anticuerpos en sueros de pacientes, que eran persistentemente negativos, con la IHA, es muy prometedor, lo que indica que ambos formatos de inmunoensayo serán ideales para el diagnóstico rápido y confiable de la melioidosis en pacientes de zonas no endémicas. El estudio fue publicado en la edición de febrero 2013, de la revista Diagnostic Microbiology and Infectious Disease.

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James Cook University