Evalúan inmunoensayo para medición cuantitativa de α1-antitripsina en materia fecal

La medición de la proteasa, α1-antitripsina (A1A), en muestras de heces se puede utilizar para detectar la presencia de proteínas del suero en el tracto gastrointestinal, una señal de enteropatía con pérdida de proteínas (PLE).

 

Las principales causas de PLE se pueden dividir en trastornos gastrointestinales erosivos y no erosivos, así como aumento de la presión venosa central o por la obstrucción linfática mesentérica y entre estos trastornos se encuentran la enteritis, la enfermedad de Crohn, la colitis ulcerosa y la enfermedad celíaca.

 

Los científicos de los Laboratorios de Patólogos Universitarios y Regionales Asociados (ARUP) (Salt Lake City, UT, EUA) utilizaron muestras de heces residuales, enviadas a los laboratorios ARUP para la realización de pruebas de A1A fecal, así como sueros y muestras de heces apareadas obtenidas a intervalos determinados de voluntarios sanos. La A1A en las heces se midió con un ensayo de inmunoabsorción ligado a enzimas, basado en anticuerpos policlonales (ELISA). Se determinaron la imprecisión del análisis, la sensibilidad analítica, la linealidad, la exactitud, la estabilidad del analito, y los intervalos de referencia.

 

La A1A en heces se midió mediante el uso de un análisis ELISA para la α1-antitripsina humana (ImmuChrom, Heppenheim, Alemania). Este ensayo es un método inmunométrico policlonal utilizado para cuantificar la A1A extraída de heces. Las señales de las placas ELISA fueron cuantificadas con un lector de placas SPECTRAmax PLUS (Molecular Devices LLC, Sunnyvale, CA, EUA). Los intervalos de referencia para la A1A en heces y la depuración de A1A fueron establecidos utilizando muestras de heces a intervalos definidos y sueros recogidos de 124 voluntarios sanos (62 varones, 62 mujeres, edades de 19-61 años).

 

Los investigadores encontraron que el límite de cuantificación del método ELISA utilizado fue de 2,0 ng/mL, y el ensayo fue lineal hasta 85 ng/mL. La recuperación media de A1A añadida a las muestras fue de 108,2% y la A1A fue estable en las heces durante un mínimo de dos días, siete días y tres meses a temperatura ambiente, 4°C y 8°C, y -20°C, respectivamente. Los límites de referencia del percentil 95 superior para la A1A y la depuración de la A1A en las heces, fueron de 0,48 mg/g y 49 mL/día, respectivamente.

 

Los autores concluyeron que el ELISA ImmuChrom humano A1A, demuestra características de desempeño aceptables para la cuantificación de A1A en extractos de heces. Más aún, este ELISA en heces puede ser usado en combinación con el análisis para A1A en suero, Tina-Quant (Roche Diagnostics, Basilea, Suiza) para evaluar la depuración de A1A para el diagnóstico y la monitorización de la PLE. El estudio fue publicado en la edición de julio de 2016 de la revista Journal of Applied Laboratory Medicine.

Enlaces relacionados: