Desarrollan análisis micro LC-MS/MS de alta sensibilidad para estradiol en suero

 

Los científicos de la Universidad de Chicago (Illinois, EUA) utilizaron muestras para la comparación de método usando muestras sobrantes recuperadas del laboratorio de química clínica. Se mezcló un total de 290 μL de muestra con estándar interno (EI), E2-d4, y se extrajo con una mezcla de hexano/acetato de etilo (90/10) (v/v). Después de la extracción, la muestra se separó mediante un sistema de micro LC 200 de Eksigent Ekspert, con una velocidad de flujo de 35 μL/min en un tiempo total de procesamiento de 3,5 minutos y se detectó a través de un espectrómetro de masas QTRAP 6500 (Sciex, Framingham, MA, EUA) en un modo negativo usando transiciones: 271/145 (cuantificador) y 271/143 (calificador). En este método, era crucial usar columnas de HPLC con estabilidad a un pH> 10.

 

Las mediciones de E2 por LC-MS / MS se compararon con el inmunoensayo automatizado Cobas 8000 E2 II (Roche Diagnostics, Basilea, Suiza) utilizando 42 muestras de plasma recogidas en tubos de heparina de litio y con un radioinmunoensayo indirecto desarrollada en el laboratorio usando 38 muestras de suero recogidas en tubos de suero sin aditivo. El método LC-MS/MS mostró una buena correlación con la prueba E2 RIA y una modesta correlación con el inmunoensayo automatizado E2 Roche Cobas. El estudio de validación demostró intervalos lineales amplios que oscilaban desde 3,0 hasta 820 pg/mL. La precisión total fue inferior al 15% en todos los niveles de control de calidad (QC), y el límite de cuantificación (LC) fue de 3,0 pg/mL. El estudio fue publicado en la edición de julio 2016 de la revista Journal of Applied Laboratory Medicine.

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