Análisis de citometría de flujo mide función de células NK

Se ha evaluado la función de las células NK (por sus siglas en inglés, natural killer) en los adultos sanos usando un análisis de pérdida de NK inducida por el objetivo (TINKL).

El análisis TINKL es un análisis sensible de citometría de flujo para medir la función de las células NK; su aplicación clínica ha sido evaluada y se midió la actividad, que es independiente del número de células NK en el análisis.

Inmunólogos en el Hospital de Canberra (Garran, ACT, Australia) recolectaron sangre de 70 varones adultos sanos y 53 voluntarias sanas. Su edad promedio (± desviación estándar fue de 38 ± 11 años, con un intervalo de 19 a 65 años. Se recolectó sangre venosa en vacutainers que contenían ácido etilendiaminotetraacético (EDTA) y las muestras fueron procesadas en un plazo de 24 horas. Las células mononucleares en sangre periférica fueron aisladas criopreservadas y almacenadas en nitrógeno líquido. En el día anterior al análisis, las PBMC fueron descongeladas y mantenidas en cultivo durante la noche.

El análisis TINKL fue realizado usando células eritroleucémicas K562 sensibles a las células NK, para medir el asesinato natural y la célula linfoblastoide, Raji B, resistente a las NK, en la presencia de CD20. El anticuerpo monoclonal, Rituximab fue usado para medir el asesinato dependiente de anticuerpos. La función de las células NK en sangre periférica medida con el análisis TINKL fue evaluada en muestras repetidas de 123 adultos sanos.

Las PBMC fueron evaluadas en 21 ensayos durante un período de tres meses. La pérdida de NK fue de 31% ± 10% (intervalo de 7% a 55%) como consecuencia del asesinato natural y de 39% ± 10% (intervalo de 14% a 64%) como consecuencia del asesinato dependiente de anticuerpos. La variación en la función de las células NK en la población medida por el análisis TINKL es mayor de lo que se podía esperar por la variabilidad inter-experimental. El coeficiente de variación (CV) intra-experimental fue en promedio 11% para el asesinato natural y 3% por el asesinato dependiente de anticuerpos, en comparación con 14% y 9% respectivamente para la variación inter-experimental.

Los autores concluyeron que sus datos suministran información adicional sobre el análisis TINKL, relevante al análisis de la función de las células NK en la clínica. La variabilidad intra-experimental y la variabilidad inter-experimental del análisis han sido cuantificadas y ahora se está registrando el intervalo grande en la función de células NK en donantes sanos. El estudio fue publicado el 6 de abril de 2013, en la revista Journal of Immunological Methods.

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The Canberra Hospital