Desarrollan inmunoanálisis para medir autoanticuerpos contra la vimentina

Se ha desarrollado un inmunoanálisis con perlas, para cuantificar los niveles circulantes de anticuerpos contra la vimentina, y para analizar la factibilidad de usar estos autoanticuerpos como un biomarcador para el diagnóstico clínico.

La vimentina es una proteína filamentosa intermedia, generalmente expresada en el citosol de muchos tipos de células adultas, incluyendo los leucocitos, fibroblastos y células endoteliales. Se sabe que existen varias isoformas de vimentina específicas para varios tejidos y/o lesiones que pueden desencadenar respuestas autoinmunes debido a las variaciones estructurales o conformacionales aberrantes.

Los científicos del Centro Médico de la Universidad Rush (Chicago, IL, EUA) evaluaron la eficacia de la prueba recién desarrollada en muestras de suero desechadas recogidos de 51 pacientes sometidos a trasplante renal con disfunción del injerto y compararon los resultados con las muestras de control de 20 individuos correspondientes en edad y género.

Las microsferas Magplex (Luminex Corporation, Austin, TX, EUA) fueron utilizados en el desarrollo de este ensayo de autoanticuerpos anti-vimentina y fueron procesados en lotes de 106 perlas. Se añadió vimentina humana recombinante (R & D Systems, Minneapolis, MN, EUA) a las perlas MagPlex y se procesaron las muestras de suero. El desempeño del ensayo y la validación de las microesferas, se llevó a cabo mediante la lectura en un sistema Luminex FlexMap 3-D, con una lectura mínima de 50 perlas en cada pocillo. Se informaron los valores de intensidad de fluorescencia media (MFI) para las condiciones con el fin de permitir la evaluación de la eficacia de acoplamiento y la evaluación preliminar de un intervalo de análisis.

La evaluación preliminar del ensayo demuestra niveles circulantes significativamente más altos de anticuerpos anti-vimentina en 51 casos de rechazo de aloinjerto renal en comparación a 20 casos de controles de la misma edad. Pruebas repetidas de tres lotes distintos de ensayos proporcionan los parámetros de intervalo de análisis de 0,18 a 15 mg/mL; el parámetro mediano de recuperación entre ensayos estuvo dentro del 1% de lo esperado, y la variación entre ensayos fue de un 7%.

Los autores llegaron a la conclusión de que su ensayo de captura directa para autoanticuerpos anti-vimentina se desarrolló y validó analíticamente con éxito. La evaluación preliminar de este ensayo contra los materiales de pacientes fue prometedora y justifica pruebas adicionales con cohortes más grandes en estudios futuros. El estudio fue publicado en la edición de mayo 2014 de la revista Journal of Immunological Methods.


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