Análisis molecular basado en reactivos secos facilita diagnóstico de úlcera de Buruli

La úlcera de Buruli es una enfermedad tropical desatendida, causada por Mycobacterium ulcerans y que se manifiesta como una enfermedad de la piel, es la tercera enfermedad micobacteriana más común y su rápido diagnóstico y el tratamiento son esenciales.

La reacción en cadena de la polimerasa (PCR) se considera el método más sensible para la confirmación, por el laboratorio, de la úlcera de Buruli, pero esta técnica sigue siendo costosa e implica reactivos no adecuados para uso en países tropicales con malas condiciones de almacenamiento, lo que dificulta el desarrollo de un diagnóstico confiable a través de una PCR cuantitativa (qPCR).

Científicos de diversas instituciones francesas como la Universidad de Angers (Francia), compararon la eficacia de tres mezclas secas, diferentes, de qPCR, liofilizadas con varias concentraciones de crioprotectores, con la de una mezcla recién preparada, para la detección de una gama estándar de concentraciones de ADN de M. ulcerans. Los científicos evaluaron la resistencia al calor de las mezclas secas, comparándolos con la mezcla fresca después del calentamiento. También evaluaron una de las mezclas secas en condiciones de campo, mediante el análisis de 93 muestras de pacientes con sospecha de úlceras de Buruli.

Para la validación de la mezcla seca en condiciones de campo, la mezcla seca seleccionada fue evaluada en 48 hisopos, 27 muestras de tejido, y 18 aspirados con aguja fina (ACAF) de 93 pacientes con sospecha de úlcera de Buruli. La amplificación de ADN y la detección fueron realizadas con un termociclador Chromo4 (Bio-Rad; Hércules, CA, EUA). La mezcla seca era altamente resistente al calor, de sensibilidad y eficiencia similar a la mezcla fresca y más fácil de usar que la mezcla fresca. Los investigadores encontraron que 55 muestras fueron positivas para M. ulcerans ADN y que 38 fueron negativas.

Los autores concluyeron que las mezclas de qPCR secas son adecuadas para uso en el diagnóstico de la infección por M. ulcerans en los países endémicos. El formato fácil de usar de esta mezcla hace posible que el personal no capacitado realice pruebas de diagnóstico con un riesgo reducido de contaminación. La posibilidad de utilizar esta mezcla, ya sea en forma de vial o tira ofrece considerable flexibilidad para el manejo de pequeñas o grandes cantidades de muestra. La mezcla seca para qPCR podría ser utilizada como una herramienta fiable para el diagnóstico de la úlcera de Buruli en el campo. El estudio fue publicado el 1 de abril de 2015, en la revista Public Library of Science Neglected Tropical Diseases.


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University of Angers

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