Sistema biomolecular para la cuantificación de proteínas

Se presentó un sistema para la cuantificación rápida, simplificada de proteínas que permite la medición infrarroja de las uniones amida en las cadenas de proteínas.

El sistema no se basa en la composición de los aminoácidos las propiedades de unión con colorantes o el potencial redox, a diferencia de los análisis convencionales basados en la espectroscopía ultravioleta-visible (UV-Vis), que dependen de la absorbancia por los aminoácidos aromáticos de las proteínas y por lo tanto, tienen utilidad limitada.

El sistema Direct Detect emplea una membrana hidrofílica de politetrafluoroetileno (PTFE) diseñada para ser transparente en la mayoría de la región espectral infrarroja y permite la aplicación de soluciones biomoleculares directamente en la membrana. El sistema permite una cuantificación de proteínas más universalmente aplicable y rápida, requiriendo un consumo mínimo de muestra. La exactitud del sistema y la precisión son comparables con los resultados obtenidos mediante análisis de aminoácidos, un estándar exacto para la cuantificación, que sin embargo, puede llevar mucho tiempo y es costoso.

El sistema se basa en la detección infrarroja de biomoléculas, de modo que los usuarios puedan obtener una cuantificación exacta y reproducible de proteínas en la presencia de agentes reductores y detergentes. Como resultado, el sistema Direct Detect (EMD Millipore, Billerica, MA, EUA) puede medir las concentraciones de proteína desde 0,2 mg/mL hasta 5 mg/mL en cuestión de segundos, sin ninguna tipo de coloración bio- o inmunoquímica, directamente, a partir de las muestras, incluidas las soluciones tamponadas.

John Sweeney, Jefe del Campo de Negocios de Ciencias Biológicas en EMD Millipore, dijo: “Además de sus poderes de análisis, el sistema Direct Detect ofrece una salida innovadora de los tradicionales requisitos de preparación de muestras típicos de la cuantificación de biomoléculas. Después de que las muestras son detectadas en las tarjetas de análisis, pueden ser almacenados en condiciones ambientales sin cambio apreciable en la lectura. Otra ventaja importante sobre los ensayos convencionales es que la curva de calibración estándar de Direct Detect requiere la generación, una sola vez, lo que proporciona un ahorro adicional de tiempo y facilidad de uso”. EMD Millipore es una división de Merck (Darmstadt, Alemania).

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