Un inmunoanálisis altamente sensible detecta la proteína 2 rica en histidina de la malaria

La detección de infecciones submicroscópicas en entornos de baja prevalencia se ha convertido en un desafío cada vez más importante para las estrategias de eliminación de esta enfermedad.

Las pruebas de diagnóstico rápido (RDT, por sus siglas en inglés) actuales para la malaria por Plasmodium falciparum son inadecuadas para detectar infecciones de baja densidad. Por lo tanto, existe la necesidad de desarrollar herramientas de diagnóstico de campo más sensibles. En paralelo, un ensayo de referencia de laboratorio altamente sensible será esencial para evaluar las nuevas herramientas de diagnóstico.

Un equipo de científicos internacionales asociados principalmente con PATH (Seattle, WA, EUA) recolectó muestras de sangre total de los participantes del estudio de Karen Village, Myanmar y Nagongera, Uganda. Se determinó la presencia o ausencia de la proteína rica en histidina 2 de P. falciparum (HRP2) mediante el ELISA de Alere Malaria Ag P.f (HRP2) (HS ELISA, Alere Inc, Waltham, MA, EUA). El desempeño analítico y clínico de la prueba HS ELISA se determinó utilizando el análisis P. falciparum HRP2 recombinante (Microcoat Biotechnologie GmbH, Bernried am Starnberger See, Alemania), parásitos de cultivo nativo de P. falciparum y muestras de sangre total archivadas con alto pedigrí clínico.

Los científicos informaron que la prueba HS ELISA tiene una sensibilidad analítica de menos de 25 pg/mL y muestra una fuerte especificidad por la HRP2 de P. falciparum cuando se analiza contra cepas de cultivos nativos de P. falciparum con deleciones de los genes pfhrp2 y pfhrp3. En comparación con las muestras clínicas de sangre total con resultados concordantes para la microscopía y de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), el HS ELISA mostró una sensibilidad diagnóstica del 100% y una especificidad diagnóstica del 97,9%. Para las muestras positivas de P. falciparum con concentraciones de HRP2 por debajo de 400 pg/mL, la sensibilidad y especificidad fueron del 100% y 88,9%, respectivamente. La sensibilidad y especificidad general para todas las 352 muestras fueron de 100% y 97,3%.

Los autores concluyeron que la prueba HS ELISA demostró una sensibilidad y especificidad aceptables para detectar la HRP2 de P. falciparum, incluida la proteína recombinante, el cultivo nativo de parásitos de P. falciparum y las muestras clínicas de sangre total. Este nuevo ensayo será útil para evaluar nuevas herramientas de diagnóstico y posiblemente otros ensayos de intervención de malaria debido a su límite inferior de detección de la HRP2 de P. falciparum. El estudio fue publicado el 1 de noviembre de 2018 en la revista Malaria Journal.

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