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Desarrollan inmunoanálisis múltiplex para la confirmación y tipificación de las infecciones por HTLV

Por el equipo editorial de LabMedica en español
Actualizado el 23 Nov 2021
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Imagen: El sciREADER CL2 permite imágenes colorimétricas digitales de alta calidad de varios formatos de soporte (Fotografía cortesía de SCIENION)
Imagen: El sciREADER CL2 permite imágenes colorimétricas digitales de alta calidad de varios formatos de soporte (Fotografía cortesía de SCIENION)
Los virus linfotrópicos de células T humanas (HTLV) tipo 1 y tipo 2 representan entre cinco y diez millones de infecciones en todo el mundo y se transmiten a través de la lactancia, los contactos sexuales y los componentes sanguíneos celulares contaminados.

Los síndromes asociados al HTLV se consideran enfermedades desatendidas para las que no hay vacunas o terapias disponibles, por lo que es particularmente importante garantizar el mejor diagnóstico posible para permitir el asesoramiento adecuado de las personas infectadas y evitar la transmisión secundaria. El virus puede causar leucemia/linfoma de células T adultas (ATL) y una afección progresiva del sistema nervioso, conocida como mielopatía asociada a HTLV-1 o paraparesia espástica tropical.

Un gran equipo de científicos de la empresa comercial, InfYnity Biomarkers (Lyon, Francia), colaboró con varias instituciones académicas para desarrollar y validar un nuevo inmunoensayo multiplex de alto rendimiento para la confirmación y discriminación de cepas de HTLV-1 y HTLV -2. El equipo realizó un estudio prospectivo con muestras del estudio de resultados de cohorte HTLV (HOST) con sede en EUA que incluyó muestras de pacientes reclutados de cinco importantes centros de donación de sangre de EUA; además, se obtuvieron 694 muestras de suero congelado del repositorio de cohortes. En el estudio se incluyó solo la primera muestra analizada de cada participante, más específicamente, 199 muestras positivas para HTLV de 199 participantes (100 HTLV-1 de 100 pacientes y 99 HTLV-2 de 99 pacientes) y 198 muestras negativas de 198 participantes. Se recolectaron otras muestras de Francia y Canadá.

La plataforma multiplex se utilizó primero como herramienta para identificar antígenos adecuados y en un segundo paso para el desarrollo del ensayo. El ensayo Multi-HTLV se compone de (i) tres puntos de antígeno confirmatorios para la unión de anticuerpos HTLV-1 y HTLV-2 específicos y derivados de epítopos inmunodominantes de tipo común y específico de tipo de env GP21, env GP46 y gag P19; y (ii) tres puntos de antígeno discriminatorias derivadas de epítopos inmunodominantes específicos de HTLV-1 env GP46, HTLV-1 gag P19 y HTLV-2 env GP46.

La prueba Multi-HTLV se realizó de manera muy similar a un ensayo ELISA estándar que permite la detección simultánea de anticuerpos circulantes contra un conjunto de antígenos selectivos y validados. Cada placa fue leída y analizada, tanto visualmente como utilizando un lector de microarrays específico, sciREADER CL2 (SCIENION, Berlín, Alemania), que adquiere imágenes digitales de alta resolución y un software integrado calcula la intensidad de píxeles para cada punto.

Los investigadores informaron que el ensayo Multi-HTLV demostró un desempeño muy alto para la confirmación y la discriminación de cepas con una sensibilidad del 100%, una especificidad del 98,1% y una exactitud de tipificación del 100% en las muestras de validación. El ensayo se puede interpretar de forma visual o automática con un lector de imágenes colorimétricas y un algoritmo personalizado, lo que proporciona resultados altamente confiables. Observaron, en 35 de 60 pacientes, una cierta dinámica en los niveles de anticuerpos entre la donación inicial y los 10-11 años de seguimiento.

Los autores concluyeron que el Multi-HTLV, recientemente desarrollado, es muy competitivo con los ensayos confirmatorios utilizados actualmente y reduce considerablemente el número de resultados indeterminados. La naturaleza multiparamétrica del ensayo abre nuevas vías para estudiar las firmas serológicas específicas de cada paciente, seguir la evolución de la infección y explorar la utilidad para el pronóstico de la enfermedad por HTLV. El estudio fue publicado el 1 de noviembre de 2021 en la revista PLOS Neglected Tropical Diseases.

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