Inmunoensayo rápido muestra potencial para el diagnóstico de la enfermedad de Lyme

Los Centros para el Control y la Prevención de Enfermedades (CDC) de los Estados Unidos recomiendan un protocolo de dos niveles: la prueba ELISA sensible se realiza primero, y si es positiva o equívoca, se ejecuta la prueba de Western blot más específica. Sin embargo, la confiabilidad del protocolo de dos niveles de los CDC es controvertida.

Los estudios han demostrado que la prueba Western blot IgM tiene una especificidad del 94-96% para las personas con síntomas clínicos de la enfermedad temprana de Lyme. La prueba ELISA inicial tiene una sensibilidad de aproximadamente el 70%, y en las pruebas de dos niveles, la sensibilidad general es solo del 64%, aunque esto aumenta al 100% en el subgrupo de personas con síntomas diseminados, como artritis. Se han informado ampliamente resultados de pruebas erróneos en las etapas temprana y tardía de la enfermedad, y pueden ser causados por varios factores, incluidas las reacciones cruzadas con anticuerpos de otras infecciones, como el virus de Epstein-Barr y el citomegalovirus, así como con el virus del herpes simple.

Como alternativa al protocolo de dos niveles, los investigadores del NIH/Instituto Nacional de Alergias y Enfermedades Infecciosas (Bethesda, MD, EUA) y colaboradores en varias instituciones, incluida la Universidad de Columbia (Nueva York, NY, EUA) y el Centro de Ciencias de la Salud de la Universidad de Tennessee (Memphis, EUA) desarrollaron un inmunoensayo sensible basado en tres antígenos de Borrelia burgdorferi.

Los investigadores utilizaron suero humano rigurosamente caracterizado como de enfermedad de Lyme aguda y convaleciente temprana, artritis de Lyme y síndrome posterior al tratamiento de enfermedad de Lyme, así como las muestras de control necesarias para seleccionar la mejor de las 12 proteínas de Borrelia burgdorferi para mejorar su análisis microfluídico (mChip-Ld ). La operación del mChip es similar a la de un ELISA para determinar las concentraciones de anticuerpos en suero. El mChip contiene 10 zonas, que detectan el paso de una pequeña cantidad (aproximadamente un microlitro) de sangre. Los resultados se pueden obtener en un formato codificado por colores en aproximadamente 15 minutos.

Los investigadores seleccionaron tres antígenos (3Ag) para incluir en el mChip-Ld: VlsE y un péptido sintético patentado de 33 mers (unidades repetidas) (PepVF) para capturar la sensibilidad en todas las etapas de la enfermedad, y OspC para la enfermedad de Lyme temprana.

Los resultados revelaron que estos biomarcadores fueron más efectivos que los utilizados previamente para identificar signos de infección de la enfermedad de Lyme en muestras en etapas tempranas, posiblemente porque estos antígenos pudieron detectar anticuerpos que alcanzaron su punto máximo en las primeras dos a seis semanas después de la infección.

Los investigadores sugirieron que sus resultados abrieron la puerta para el desarrollo de una prueba de diagnóstico única, rápida y multiplexada para el uso en el punto de atención que se podría diseñar para identificar el estadío de la enfermedad de Lyme.

El estudio fue publicado en la edición en línea del 9 de octubre de 2019 de la revista Journal of Clinical Microbiology.

Enlace relacionado:
NIH/Instituto Nacional de Alergias y Enfermedades Infecciosas
Universidad de Columbia
Centro de Ciencias de la Salud de la Universidad de Tennessee