Prueba molecular cuantitativa mejora diagnóstico de la brucelosis

Se realizaron dos conjuntos de cultivos de sangre, un análisis cuantitativo de rt-PCR en suero, la prueba de Rosa de Bengala, de aglutinación estándar (SAT) y de inmunocaptura-aglutinación para todos los pacientes con sospecha de infección por Brucella. En los pacientes expuestos, pero asintomáticos, sólo se realizaron la serología y la PCR en tiempo real.

Los hemocultivos fueron positivos en tres de los ocho casos sintomáticos, y todos ellos se identificó la Brucella melitensis biovar 3. El resultado de la prueba de Rosa de Bengala fue positivo en siete de los sujetos sintomáticos. La prueba SAT y la prueba de aglutinación por inmunocaptura tenían títulos dentro de la gama para el diagnóstico en seis pacientes. Los resultados de las pruebas SAT y de aglutinación-inmunocaptura fueron positivas, pero mostraron títulos por debajo del intervalo de diagnóstico en los dos casos restantes, y en los individuos asintomáticos.

Las amplificaciones de PCR fueron realizadas en tubos capilares con el instrumento LightCycler (Roche Diagnostics, San Cugat del Valles, España) utilizando los cebadores obtenidos de Tib-Molbiol (Berlín, Alemania). Cada ensayo fue realizado usando una curva estándar de ADN genómico de B. melitensis (2 x 105 copias del genoma por cada 2 ml de extracto de ADN) y el control negativo (agua). La rt-PCR fue positiva en todas los individuos que se enfermaron y negativos en los que no desarrollan síntomas.

Los autores concluyeron que la rt-PCR cuantitativa podría ser una herramienta útil para el diagnóstico rápido de las personas involucradas en los brotes de brucelosis por el consumo ocasional de leche o quesos, sin pasteurizar. Sin embargo, es posible que esta tecnología no tenga ningún uso práctico para el manejo de brotes en personas ocupacionalmente expuestas, y se necesitan estudios para determinar su utilidad en los brotes que afectan a los trabajadores de laboratorio. El estudio fue publicado en la edición de noviembre 2011, de la revista, Diagnostic Microbiology and Infectious Disease.

Enlaces relacionados:

Carlos Haya University Hospital

Roche Diagnostic

Tib-Molbiol