Herramienta de diagnóstico molecular detecta la encefalitis toxoplásmica

Se ha desarrollado una prometedora herramienta diagnóstica para identificar pacientes que están inmunocomprometidos y que tienen las lesiones cerebrales focales más comunes.

Se evaluaron la exactitud diagnóstica, el beneficio técnico y la aplicación clínica de un análisis de reacción en cadena de la polimerasa de trascripción reversa, dúplex, (RT-PCR dúplex) para el diagnóstico de la encefalitis toxoplásmica (ET).

En la Universidad de Mahidol (Bangkok, Tailandia) se inscribieron en un estudio prospectivo, realizado entre julio de 2007 enero de 2009, a los individuos con infección avanzada con el virus de la inmunodeficiencia humana (VIH) e infecciones oportunistas del sistema nervioso central. Las muestras de sangre y líquido cefalorraquídeo fueron analizadas por RT-PCR dúplex para detectar los genes del taquizoíto móvil o el bradizoíto intracelular de Toxoplasma gondii.

El ensayo comprendió tres etapas principales: extracción de ácidos nucleicos, transcripción inversa y reacción en cadena de la polimerasa dúplex. Dos conjuntos de cebadores fueron utilizados en este estudio, uno específico para el gen del antígeno de superficie del taquizoíto (SAG1) y el otro específico para el gen del antígeno del bradizoíto (BAG1). Originalmente, había 70 pacientes infectados con VIH elegibles para el estudio, pero sólo 61 pudieron ser analizados. En total, hubo ocho casos confirmados de ET, de los cuales dos fueron un primer episodio y seis fueron recaídas. Cincuenta y tres eran casos no-ET con otras infecciones oportunistas del sistema nervioso central.

El análisis RT-PCR dúplex se realizó en el aparato MasterCycler-Gradient (Eppendorf, Hamburgo, Alemania) y mostró una alta exactitud diagnóstica, con un 100% de especificidad y valor predictivo positivo, así como el 87,5% de sensibilidad. Su eficacia alcanzó 98,3%. Este método de diagnóstico fue rápido, sólo necesitó técnicos moderadamente cualificados y era cuatro veces más barato que los anteriores procedimientos estándar. Funcionó muy bien para las muestras de sangre, incluso después de que el tratamiento con drogas se había iniciado.

Los autores concluyeron que la prueba de RT-PCR también es útil para el diagnóstico de toxoplasmosis extracerebral en pacientes con el síndrome de inmunodeficiencia adquirida (SIDA), en los que las características clínicas y radiológicas son más difíciles de interpretar. A pesar de que se necesitan muestras seriadas de pacientes con SIDA para una evaluación adicional de esta técnica, en particular para aquellos que tienen ET, con y sin tratamiento específico, todavía puede ser recomendada para uso como un procedimiento diagnóstico presuntivo, alternativo, especialmente en entornos de escasos recursos. El estudio fue publicado en la edición de abril 2012, de la revista International Journal of Infectious Diseases.


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Mahidol University
Eppendorf