Buen desempeño para análisis de sangre automatizado del Ébola

El brote prolongado y devastador de la enfermedad del virus del Ébola (EVD) en África Occidental ha puesto de manifiesto la necesidad de métodos de diagnóstico mejorados para reducir los tiempos de entrega de resultados y aumentar el acceso a las pruebas, sin sacrificar la exactitud del análisis.

 

El diagnóstico del EVD se ha basado principalmente en la reacción en cadena de la polimerasa de transcripción inversa en tiempo real (RT-PCR) que se realiza en los laboratorios de contención biológica de campo en muestras enviadas de sangre venosa (ST) o de frotis bucal (FB). Las pruebas convencionales basadas en la RT-PCR son engorrosas, requiriendo múltiples etapas de procesamiento desde la lisis de la muestra, a través de la extracción de ácido nucleico, a la propia etapa de RT-PCR.

 

Un equipo internacional de científicos dirigidos por los de Salud Pública Inglaterra (Porton Down, Reino Unido) analizó 218 muestras de ST recogidas mediante la punción venosa de pacientes con sospecha o confirmación de EVD, así como muestras de 71 FB recogidos como parte de un programa nacional de cribado post mortem, entre el 7 de marzo y el 20 de julio de 2015. Las muestras de EDTA-ST y de FB fueron analizadas con los análisis Xpert (objetivos: genes de glicoproteína [GP] y nucleoproteína [NP]) y Trombley (objetivo: gen NP), en paralelo.

 

El análisis GeneXpert Ébola fue realizado utilizando el kit de análisis GeneXpert Ébola, REBOLA-50 (Cepheid, Sunnyvale, CA, EUA). Todos los pasos anteriores a cargar los cartuchos de análisis en la plataforma del instrumento Xpert, se llevaron a cabo en aisladores flexibles de película (FFI). Todas las muestras fueron incubadas en el reactivo de muestra, durante 20 minutos, a temperatura ambiente, y luego fueron trasladadas a los cartuchos de prueba Xpert Ébola, teniendo el cuidado de no introducir burbujas de aire. Los cartuchos fueron cargados en la plataforma GeneXpert XVI de Cepheid.

 

Después de excluir algunas muestras que arrojaron resultados Xpert reportados como no válidos o error, 22 de las 22 muestras positivas Trombley en ST eran Xpert-positivas (sensibilidad del 100%), y 181 de 189 muestras de ST, Trombley-negativas, fueron Xpert-negativas (especificidad del 95,8%). En 64 muestras de FB con resultados válidos para tanto los análisis Trombley como Xpert, la sensibilidad y especificidad del ensayo Xpert fueron ambas de 100%. Para las muestras de sangre con un volumen suficiente para los dos ensayos, los investigadores también compararon obtener las muestras de sangre usando una versus con un hisopo y encontraron que 78 de 79 resultados emparejados eran concordantes, lo que sugiere que la recolección del mismo volumen de sangre por punción digital utilizando un hisopo (que es potencialmente más fácil de hacer en el campo), por tanto, puede proporcionar resultados precisos cuando se utiliza el ensayo de GeneXpert.

 

Los autores concluyeron que sus hallazgos sugieren que la prueba Xpert Ébola podría facilitar el acceso ampliado a las pruebas del virus del Ébola. Sus datos indican que este ensayo Xpert Ébola tiene un excelente desempeño en un entorno de laboratorio de campo utilizando tanto muestras de ST como de FB y por tanto, proporcionan la oportunidad de un diagnóstico de alta precisión, rápido de muestra a respuesta, para el EVD. El estudio fue publicado el 29 de marzo de 2016 en la revista Public Library of Science Medicine.

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