Desarrollan nuevo método para diagnosticar la úlcera de Buruli

Una úlcera de Buruli es una enfermedad de la piel subcutánea incluida entre las enfermedades tropicales desatendidas. Es muy importante la detección y el manejo temprano de los casos para reducir la morbilidad y la desfiguración característica que acompaña la enfermedad.

 

El diagnóstico de úlcera de Buruli (UB) se basa en evidencia clínica que puede conducir a un diagnóstico erróneo, por lo que la confirmación microbiológica es esencial para reducir el abuso de medicamentos, ya que los fármacos anti-micobacterianos también se utilizan para el tratamiento de la tuberculosis.

 

Unos científicos asociados con la Universidad de Ghana (Accra, Ghana), desarrollaron un método para diagnosticar la UB, utilizando aptámeros que se unen a la partícula lipídica, micolactona, producida por el agente causal, Mycobacterium ulcerans. El equipo recolectó hisopos y aspiraciones con aguja fina, de 41 pacientes sospechosos de tener UB. Las muestras se analizaron por reacción en cadena de la polimerasa para la repetición de la secuencia, IS2404, el cultivo y un ensayo de oligonucleótidos unido a enzimas (ELONA). Los aptámeros que se unen a la micolactona fueron aislados mediante la evolución sistemática de los ligandos, a través del proceso de enriquecimiento exponencial (SELEX). Para medir su afinidad y la especificidad a la micolactona, los aptámeros fueron seleccionados mediante calorimetría de valoración isotérmica. Los ensayos ELONA, fueron medidos a 450 nm de absorbancia, utilizando un lector de placas, MultiSkan Go (Thermo Scientific, Waltham MA, EUA). 

 

Los investigadores descubrieron que cinco de los nueve aptámeros seleccionados se unían, de manera significativa, a la micolactona; de estos, tres fueron capaces de diferenciar entre las micobacterias productoras de micolactonas, M. marinum y otras bacterias, mientras que otras dos también se unieron significativamente a M. smegmatis. Sus constantes de disociación se encontraban en el rango micro-molar. Catorce muestras de hisopos dieron positivo tanto para el cultivo, como para la PCR IS2404, mientras que la positividad, observada entre los aptámeros, varió de uno a siete. El ensayo basado en aptámeros se utilizó en un estudio de casos control y tuvo una sensibilidad del 50% y una especificidad del 100%.

 

La prueba basada en aptámeros tuvo una sensibilidad de 50%, que es comparable a la de microscopía y el cultivo, mientras que la especificidad era comparable a la de la PCR IS2404. Los autores concluyeron que su prueba de concepto preliminar, indica que el diagnóstico de la úlcera de Buruli con aptámeros de ácido ribonucleico (ARN), es factible y puede ser utilizada como prueba para los puntos cercanos al paciente, tras la incorporación en una plataforma de diagnóstico. El estudio fue publicado el 24 de octubre de 2016, en la revista Public Library of Science Neglected Tropical Diseases.

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University of Ghana