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27 jul 2020 - 30 jul 2020

Análisis diagnóstico identifica las células madre leucémicas

Por el equipo editorial de LabMedica en español
Actualizado el 22 Jan 2020
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Imagen: El Citómetro de Enfoque Acústico, Attune NxT, es ideal para estudios de inmunofenotipificación y señalización, análisis del ciclo celular, detección de eventos raros, análisis de células madre, estudios de cáncer y de apoptosis, ensayos microbiológicos y más (Fotografía cortesía de Thermo Fisher Scientific)
Imagen: El Citómetro de Enfoque Acústico, Attune NxT, es ideal para estudios de inmunofenotipificación y señalización, análisis del ciclo celular, detección de eventos raros, análisis de células madre, estudios de cáncer y de apoptosis, ensayos microbiológicos y más (Fotografía cortesía de Thermo Fisher Scientific)
La leucemia mieloide aguda (LMA) es el tipo más común de leucemia en adultos. Se caracteriza por la expansión patológica de células inmaduras (mieloblastos) que invaden la médula ósea y se expanden hacia la sangre, afectando la producción del resto de las células sanas.

Aunque los pacientes con LMA generalmente responden bien a los tratamientos basados en quimioterapia, gran parte de ellos eventualmente recaen o muestran resistencia a estos procedimientos. La causa de la recaída o la resistencia al tratamiento a veces se debe a la existencia de células madre leucémicas capaces de comenzar de nuevo el cáncer y, a su vez, de ser resistentes a la quimioterapia. Sin embargo, identificarlos es un desafío ya que no hay marcadores específicos para detectarlas y aislarlas.

Los científicos del Instituto de Investigación contra la Leucemia Josep Carreras (Badalona, España) y sus colegas, llevaron a cabo un estudio prospectivo de cohorte en el hospital que incluyó a 43 pacientes recién diagnosticados con leucemia mieloide aguda. Hubo 30 hombres y 13 mujeres; con una mediana de edad de 63 años (rango 26-91) en la cohorte de estudio. A un total de 12 de los 43 pacientes les realizaron un trasplante alogénico de células madre (ASCT) después de la quimioterapia.

El equipo utilizó la actividad de la fosfatasa alcalina celular por citometría de flujo (ALP) dentro de las células leucémicas primitivas que les permitió identificar dos grupos de pacientes en el momento del diagnóstico de acuerdo con el número de blastos leucémicos que expresan ≥ 12% de células ALP+ (27 pacientes, Grupo A) y menos del 12% de las células ALP+ (16 pacientes, Grupo B). Las 38 muestras de médula ósea anticoaguladas con EDTA y cinco muestras de sangre se prepararon utilizando un método modificado, previamente desarrollado, destinado a evitar la lisis de los eritrocitos durante la preparación de la muestra, lo que puede provocar daños no deseados en los leucocitos y posiblemente en las células leucémicas.

El análisis del ciclo celular del contenido de ADN y de las células madre se realizó mediante citometría de flujo. Las células coloreadas se diluyeron con Solución Salina Equilibrada de Hank (HBSS) (volumen final de 1.000 µL) antes de la adquisición de la muestra. Todas las mediciones celulares se realizaron utilizando el citómetro de enfoque acústico Attune y el citómetro de enfoque acústico Attune NxT (Thermo Fisher Scientific, Eugene, OR, EUA).

Los científicos informaron que las diferencias en los resultados para la respuesta completa, la recaída o la resistencia al tratamiento y la salida se analizaron estadísticamente y fueron significativas, al comparar los dos grupos. Las diferencias de supervivencia global (SG) y de supervivencia libre de eventos (SSC) entre el Grupo A y B fueron estadísticamente significativas. La supervivencia de los pacientes del Grupo A fue significativamente más corta que la del Grupo B. Los pacientes con LMA tuvieron un valor medio de 18,33% de blastos ALP+ (rango 0,26-96,93). Veintisiete pacientes en el Grupo A tenían un valor medio de 23,76% de blastos ALP+ que oscilaban entre 13,83 y 96,63, y 16 pacientes en el Grupo B tuvieron un valor medio de 4,99% de células blásticas ALP+ que oscilaban entre 0,26 y 11,98.

Los autores concluyeron que se puede usar la actividad celular de ALP medida por citometría de flujo en el momento del diagnóstico para determinar las recaídas y la persistencia de la enfermedad con mayor exactitud. Las limitaciones del estudio incluyen el pequeño número de pacientes incluidos y un seguimiento corto, debido a su naturaleza prospectiva. El estudio fue publicado el 10 de diciembre de 2019 en la revista Oncotarget.

Enlace relacionado:
Instituto de Investigación contra la Leucemia Josep Carreras
Thermo Fisher Scientific


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