Utilizamos cookies para comprender de qué manera utiliza nuestro sitio y para mejorar su experiencia. Esto incluye personalizar el contenido y la publicidad. Para más información, Haga clic. Si continua usando nuestro sitio, consideraremos que acepta que utilicemos cookies. Política de cookies.
Please note that the LabMedica website is also available in a complete English version
Presenta Sitios para socios Información LinkXpress
Ingresar
Publique su anuncio con nosotros
GLOBETECH PUBLISHING LLC

Download Mobile App




Se detecta el patógeno de la úlcera de Buruli mediante un análisis isotérmico RPA

Por el equipo editorial de Labmedica en español
Actualizado el 04 Mar 2019
Print article
Imagen: El Instrumento de Diagnóstico Isotérmico T8 proporciona resultados cuantitativos y cualitativos para aplicaciones de ensayos isotérmicos de diagnóstico molecular (Fotografía cortesía de Axxin).
Imagen: El Instrumento de Diagnóstico Isotérmico T8 proporciona resultados cuantitativos y cualitativos para aplicaciones de ensayos isotérmicos de diagnóstico molecular (Fotografía cortesía de Axxin).
La úlcera de Buruli (UB) es una enfermedad tropical desatendida causada por Mycobacterium ulcerans. La patogénesis de la UB está relacionada con la producción de una toxina policétida conocida como micolactona, que es citotóxica y tiene propiedades inmunomoduladoras; la enfermedad se presenta como nódulos, placas, úlceras y edema.

La amplificación de ácidos nucleicos de la secuencia de inserción IS2404, por la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), es el método más sensible y específico para detectar M. ulcerans, el agente causal de la UB. Sin embargo, la PCR no siempre está disponible en comunidades endémicas en África debido a su costo y sofisticación tecnológica. La microscopía para los bacilos con la coloración de Ziehl-Neelsen y el cultivo para M. ulcerans tienen baja sensibilidad y la histopatología es un examen que rara vez está disponible en las áreas endémicas.

Un equipo de científicos asociados con la Universidad de Ciencia y Tecnología Kwame Nkrumah (Kumasi, Ghana) evaluó el desempeño clínico del ensayo para M. ulcerans (Mu-RPA) utilizando ADN extraído de aspirados con aguja fina o de frotis tomados de 67 pacientes en los que se sospechaba una UB y de 12 pacientes con lesiones no UB, confirmadas clínicamente. El equipo desarrolló un sistema de amplificación isotérmica de ADN utilizando el método de amplificación de la polimerasa recombinasa (RPA).

Todas las muestras se analizaron con la PCR en tiempo real y con el ensayo Mu-RPA para determinar la sensibilidad clínica y la especificidad del ensayo utilizando la PCR en tiempo real como la prueba de referencia. En el caso de la detección con la RPA en tiempo real, se utilizó el kit TwistAmp Exo de “Formulación Mejorada” (TwistDX Ltd, Cambridge, Reino Unido). Se midió la detección de fluorescencia a 570 nm para el canal FAM y se estableció un umbral al aumentar la fluorescencia por encima de las tres desviaciones estándar sobre el fondo detectado en el primer minuto de incubación. El equipo programó el fluorómetro T8 utilizando la aplicación de Escritorio T8-ISO (Axxin Pty Ltd, Fairfield, Australia) con el fin de poder detectar las diluciones más bajas que cumplían con los criterios para diferenciar las muestras positivas de los controles negativos con base en diluciones en serie del estándar molecular.

Los científicos analizaron todas las muestras utilizando los ensayos RPA y PCR en tiempo real y 58 de estas muestras fueron confirmadas por PCR como UB. De los 58 casos confirmados, 51 se identificaron correctamente mediante el ensayo de RPA con siete resultados falsos negativos con una sensibilidad del 88%. Las 21 muestras de PCR negativas fueron todas negativas por RPA, especificidad del 100% y un valor predictivo positivo (PPV) del 100% con un índice de Youden del 88%. Cuando el análisis se estratificó por tipo de muestra, la sensibilidad y la especificidad de la RPA para los hisopos en comparación con la PCR fueron del 92% y 100%, respectivamente, con un VPP del 100%. Del mismo modo, la sensibilidad y especificidad de las muestras de aspirados de aguja fina fueron 82% y 100% respectivamente.

Los autores concluyeron que el ensayo de RPA en tiempo real, desarrollado para la detección rápida y exacta del ADN de M. ulcerans tiene alta sensibilidad, especificidad y reproducibilidad y es comparable a la PCR en tiempo real. El ensayo fue significativamente más rápido que los métodos de PCR en tiempo real disponibles para detectar M. ulcerans con un tiempo de ejecución de 15 minutos, en comparación con casi dos horas para la PCR en tiempo real. Potencialmente, la prueba Mu-RPA se puede utilizar en un entorno de bajos recursos más cercano a los pacientes cuando se combina con un método rápido de extracción de ADN. El estudio fue publicado el 1 de febrero de 2019 en la revista PLOS NTD.

Enlace relacionado:
Universidad de Ciencia y Tecnología Kwame Nkrumah
TwistDX
Axxin Pty Ltd




Print article

Canales

Química Clínica

ver canal
Imagen: Las investigaciones muestran que las concentraciones de metales traza en la sangre pueden influir en la regulación de la glucosa en el embarazo (Fotografía cortesía de bluehorizon).

Regulación de la glucosa durante el embarazo es influenciada por las concentraciones de metales trazas

La diabetes gestacional es una condición en la cual una mujer sin diabetes desarrolla niveles altos de azúcar en la sangre durante el embarazo. La diabetes gestacional generalmente produce pocos síntomas;... Más

Diagnóstico Molecular

ver canal
Imagen: El escáner de detección de microarrays NimbleGen MS 200 CGH LOH (Fotografía cortesía de Roche).

Rechazo a los trasplantes renales se asocia con un locus discordante nuevo

Aproximadamente el 20% de la lista de espera de riñones en los Estados Unidos está formada por candidatos cuyos aloinjertos han fallado. El rechazo agudo es uno de los predictores más fuertes de la disminución... Más

Hematología

ver canal
Imagen: El kit Indicador de Sepsis Temprana diseñado para ser usado en instrumentos de hematología automatizados, como el analizador DxH 900 (Fotografía cortesía de Beckman Coulter).

Aprueban para comercialización en los Estados Unidos una prueba para la detección temprana de la sepsis

Una prueba para la detección temprana de sepsis ha sido aprobada para su comercialización en los Estados Unidos como un producto de diagnóstico in vitro. La sepsis es causada por una respuesta inmune... Más

Inmunología

ver canal
Imagen: El analizador de células LSRFortessa ofrece la mejor opción para la citometría de flujo, proporcionando potencia, desempeño y consistencia (Fotografía cortesía de BD Biosciences).

Estandarizada la citometría de flujo para predecir el rechazo a los trasplantes

Comprender el fenotipo inmunológico de los receptores de trasplantes con inmunosupresión estándar, terapias con células inmunitarias y nuevos tratamientos farmacológicos es esencial para mejorar los resultados... Más

Patología

ver canal
Imagen: Una prueba nueva de biopsia líquida llamada DELFI (evaluación de ADN de fragmentos para una interceptación temprana) utiliza inteligencia artificial para detectar pacientes con cáncer identificando fragmentaciones alteradas de ADN en la sangre (Fotografía cortesía de Carolyn Hruban, Universidad Johns Hopkins).

Aprendizaje automático detecta el cáncer analizando el ADN en las muestras de sangre

Los investigadores han descrito un enfoque de prueba de principio para el cribado, la detección temprana y el seguimiento del cáncer humano basado en un enfoque de aprendizaje automático que evalúa los... Más

Tecnología de Lab

ver canal
Imagen: Ejemplos de células de cáncer de mama, MDA-MB-231, migratorias y no migratorias mientras migran en el dispositivo MAqCI (Ensayo Microfluídico para la cuantificación de la invasión celular) (Fotografía cortesía de Christopher L. Yankaskas, Universidad Johns Hopkins).

Dispositivo de movilidad microfluídica indica la probabilidad de metástasis en el cáncer de mama

Se demostró que una nueva prueba de motilidad microfluídica predice con exactitud la probabilidad de que un tumor de mama genere metástasis. Las dificultades involucradas en la predicción de qué pacientes... Más

Industria

ver canal
Imagen: La solución de automatización total de laboratorios DxA (Fotografía cortesía de Beckman Coulter).

Beckman Coulter presenta una nueva solución de automatización total de laboratorios

La última incorporación de Beckman Coulter (Brea, CA, EUA) a su cartera de automatización, la solución de automatización total de laboratorios, DxA 5000, ha logrado la aprobación de la Marca CE Europea... Más
Copyright © 2000-2019 Globetech Media. All rights reserved.