Secuenciación guiada por inmunohistoquímica encuentra mutaciones en la mayoría de los adenomas productores de cortisol

El síndrome de Cushing (SC) representa una constelación de signos y síntomas asociados con la exposición crónica y excesiva a los glucocorticoides, ya sea por endocrinopatías endógenas o, más comúnmente, por fuentes farmacológicas exógenas.

El SC endógeno puede resultar de la adrenocorticotropina (ACTH) o, en raras ocasiones, de tumores secretores de hormona liberadora de corticotrofina, o de la producción autónoma de cortisol directamente por las glándulas suprarrenales, independientemente de la ACTH. Los adenomas productores de cortisol (APC) solitarios representan la mayoría de los casos de SC independiente de ACTH.

Médicos Científicos de la Facultad de Medicina de la Universidad de Michigan (Ann Arbor, MI, EUA) y sus colegas incluidos en un estudio, analizaron tejido fijado con formalina e incluido en parafina de 77 pacientes (84,4 % mujeres; mediana de edad, 52,9 años) diagnosticados con síndrome de Cushing suprarrenal independiente de adrenocorticotropina a quienes les practicaron una suprarrenalectomía unilateral. La cohorte incluyó a 32 pacientes con síndrome de Cushing manifiesto y 45 con exceso de cortisol autónomo leve.

El equipo usó inmunohistoquímica (IHC) para 17α-hidroxilasa/17,20-liasa (CYP17A1) y 3β-hidroxiesteroide deshidrogenasa (HSD3B2), e identificó 78 adenomas productores de cortisol (PC; 32 síndrome de Cushing manifiesto (OCS APC) y 46 subclínicos con exceso leve de cortisol autónomo (MACE APC). Después de confirmar la coloración adecuada bajo un microscopio óptico, los portaobjetos se escanearon electrónicamente con un PathScan Enabler IV (Meyer Instruments, Houston, TX, EUA). El ADN genómico se aisló de los FFPE de APC y se sometió a a la secuenciación de amplicón dirigida para la identificación de mutaciones somáticas.El análisis de mutación del gADN de los APC se llevó a cabo mediante NGS basada en amplicón dirigido, utilizando paneles AmpliSeq personalizados y el sistema Ion Torrent (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, EUA).

Los investigadores informaron que los genes alterados con mayor frecuencia de mutaciones somáticas fueron: CTNNB1, alterado en el 42,3 % de los adenomas; PRKACA, alterado en el 20,5 % de los adenomas; y GNAS, alterado en el 9 % de los adenomas. El gen mutado más común en aquellos con síndrome de Cushing manifiesto fue PRKACA, mientras que CTNNB1 fue la mutación más común encontrada en aquellos con un leve exceso autónomo de cortisol. El grupo encontró dos adenomas únicos en pacientes con exceso de cortisol autónomo leve que exhibieron heterogeneidad regional distinta en la expresión HSD3B2. En la secuenciación se observó una mutación somática que no se había informado previamente, PRKACA p.P244_K250delinsQ.

Juilee Rege, PhD, y Adina Turcu, MD, MS, profesoras asociadas y autoras principales del estudio, dijeron: "Este espectro único de mutaciones en el síndrome de Cushing manifiesto y el exceso autónomo leve de cortisol también indicaría un perfil transcriptómico de enzima esteroidogénica distinto, y distintas huellas dactilares de esteroides en la circulación periférica. Tales desarrollos podrían simplificar el diagnóstico de la sospecha del síndrome de Cushing, que actualmente es un proceso engorroso y de varios pasos”.

Los autores concluyen que un enfoque integral de secuenciación dirigida a genes guiado por IHC en las FFPE identificó mutaciones somáticas en el 71,8 % de los APC. Los OCS APC demostraron un perfil de mutación distinto en comparación con los APC de MACE. El estudio se publicó originalmente en la edición de febrero de 2022 de la revista The Journal of Clinical Endocrinology & Metabolism .

Enlaces relacionados:
Facultad de Medicina de la Universidad de Michigan
Meyer Instruments
Thermo Fisher Scientific

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