Prueba de PCR digital permite diagnóstico más preciso y temprano de preeclampsia en mujeres embarazadas

La identificación temprana de la preeclampsia puede ser de gran ayuda para los obstetras y ginecólogos a la hora de recomendar el uso de aspirina en dosis bajas para ayudar a prevenir la presión arterial alta asociada con esta afección. La Sociedad Estadounidense de Obstetricia y Ginecología sugiere que lo ideal es que el tratamiento comience antes de las seis semanas de embarazo en aquellas que están en riesgo. Actualmente, la única forma de evaluar el riesgo es a través de indicadores clínicos y demográficos, como la edad y los antecedentes médicos. Los intentos anteriores de descubrir biomarcadores fiables, como firmas de ARN o proteómica, no han tenido mucho éxito.

Investigadores de la Universidad de Hong Kong (Hong Kong, República Popular China) han logrado avances significativos en la creación de una prueba más precisa para detectar la preeclampsia en mujeres embarazadas. Sus últimos datos muestran que la PCR digital puede identificar eficazmente fragmentos largos de ADN libre circulante (cfDNA) que pueden diferenciar entre aquellas que desarrollan preeclampsia y aquellas con embarazos normales. Esta investigación, que se publicó a principios de este mes en la revista Prenatal Diagnosis , se basa en el trabajo anterior del equipo, que indicó que diferentes tamaños de fragmentos de ADN podrían ser un signo de preeclampsia incipiente. Aunque son datos preliminares, los científicos creen que podría convertirse en una prueba clínicamente útil.

La causa fundamental de la preeclampsia aún no se comprende completamente, pero se cree que la formación anormal de la placenta y el estrés placentario influyen. Desde el primer descubrimiento de cfDNA en plasma materno por 1997, se han observado cambios en los niveles de cfDNA en embarazos preeclámpticos. Los investigadores sospecharon que patrones únicos de fragmentación del ADN, que anteriormente habían relacionado con anomalías fetales y cánceres, también podrían encontrarse en embarazos afectados por preeclampsia. Los hallazgos iniciales, utilizando una técnica llamada secuenciación SMRT, respaldaron esta hipótesis, mostrando un perfil de tamaño de ctDNA distinto, en particular una reducción en el porcentaje de ADN libre circulante largo, en embarazos con preeclampsia.

El siguiente objetivo del equipo fue adaptar estos hallazgos a una prueba más rentable y sencilla. Utilizaron PCR digital en gotas (ddPCR) con el instrumento QX One de Bio-Rad Technologies. Para su estudio se analizaron muestras de plasma de 10 embarazos preeclámpticos y 16 embarazos normales. Los investigadores desarrollaron dos pruebas iniciales de ddPCR dirigidas a un gen de mantenimiento llamado VCP, en tamaños de fragmentos de más de 533 y 1.001 pares de bases, que fueron los tamaños principales analizados en su trabajo de secuenciación anterior. Utilizando datos de secuenciación de cfDNA de su estudio anterior, los investigadores también realizaron simulaciones de dPCR in silico para determinar los parámetros óptimos y el mejor poder diferenciador entre embarazos de control y preeclámpticos. Esto llevó al desarrollo de una tercera prueba dirigida al elemento nuclear 1 intercalado largo (LINE-1), una serie de aproximadamente 1.600 regiones repetidas en todo el genoma, dirigida a fragmentos de más de 170 pares de bases.

Los investigadores descubrieron que tanto los ensayos iniciales como el ensayo LINE-1 podían diferenciar las muestras preeclámpticas de las sanas, y el ensayo LINE-1 mostraba una mayor precisión en la diferenciación. La amplitud del ensayo LINE-1 también resultó en un enriquecimiento de 1.600 veces de los fragmentos diana en comparación con los ensayos de genes de copia única que permitieron entradas de ADN mucho más pequeñas. Se necesita más trabajo, incluidos estudios de validación con muestras de mayor tamaño y estudios para determinar que tan temprano en el embarazo podría ser efectiva esta prueba. El equipo también planea investigar cualquier factor que pueda influir en el porcentaje de fragmentos largos de cfDNA en el plasma de mujeres embarazadas.

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