Prueba molecular detecta rápidamente el virus Chikungunya

Todas las muestras de suero fueron validadas mediante una reacción en cadena de polimerasa de transcriptasa reversa en tiempo real (RT-PCR), contra el gen de glicoproteína 1 de la envoltura del CHIKV.

La prueba molecular utiliza cebadores con un promontorio de horquilla de citosina marcados con 2,7-diamino-1 ,8-naftiridina derivado (DANP) para amplificar la región del genoma de nsP2 del CHIKV, seguida por la medición de la fluorescencia emitida a partir de los complejos DANP-cebador, después de la PCR. La RT-PCR se realizó utilizando el termociclador C1000 (Bio-Rad, Hercules, CA, EUA). Las muestras fueron analizadas, después de la optimización, con ARN genómico del CHIKV usando el kit de PCR con transcripción inversa, AccessQuick (Promega, Madison, WI, EUA).

El límite de detección del análisis fue de 0,01 unidades formadoras de placa por reacción de CHIKV. Los cebadores fueron altamente específicos para la detección de CHIKV, sin ninguna reactividad cruzada con el grupo de virus de ARN validados en el estudio. Se evaluó la viabilidad de la DANP acoplado a la RT-PCR de horquilla para el diagnóstico clínico usando muestras clínicas de suero de pacientes infectados con CHIKV, y la especificidad fue del 100% y la sensibilidad del 95,5%.

Los autores concluyeron que la tecnología novedosa DANP acoplado a la RT-PCR de horquilla, es un método de detección, eficaz simple, rápido y costo efectivo, para el CHIKV. Los resultados de una evaluación de muestras de pacientes han indicado una alta sensibilidad y especificidad clínica para este método. El método puede ser una herramienta útil para la detección rápida de CHIKV durante los brotes o como un ensayo molecular en el punto de atención para las muestras de suero de pacientes en fase aguda en muchas partes del mundo. El estudio fue publicado en la edición de marzo 2013 de la revista Journal of Molecular Diagnostics.

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National University of Singapore

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