Prueba fluorescente en sangre seca mejora detección de deficiencia enzimática

De las 49 muestras deficientes, 48 tenían actividad de la enzima G6PD de ≤9,5 U/g de Hb y una muestra tenía actividad enzimática normal. Las muestras que presentaron una fluorescencia ausente o intermedio en la FST fueron analizadas para detectar la presencia de mutaciones de G6PD con ensayos de genotipificación y secuenciación directa de nucleótidos.

Todas las 38 muestras intermedias fueron de mujeres y de éstas, 21 tenían actividad de G6PD entre 20% y 60%, y 17 muestras mostraron una actividad normal de G6PD. Veintisiete de las 38 muestras estaban disponibles para el análisis de mutación de las cuales 13 tenían una actividad normal de G6PD. Once de las 13 muestras con actividad normal de G6PD presentaron mutaciones identificables de G6PD.

La identificación molecular mediante una reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real rápida (PCR) complementada por la secuencia convencional es factible para la confirmación de las variantes de G6PD. Se encontraron mutaciones de G6PD en noventa y cuatro por ciento (30/32) de los hombres afectados con un conjunto limitado de cebadores diseñados para detectar polimorfismos frecuentes en la población. El ensayo enzimático comercial, para la comparación, fue fabricado por R&D Diagnostics (Papagou, Grecia) y la amplificación del ADN y la detección en tiempo real fueron realizadas en el Rotorgene 3000 (Corbett Research, Mortlake, NSW, Australia).

Concluyeron los autores que la FST es eficaz para la identificación de varones hemicigotos deficientes y también es capaz de identificar a las mujeres heterocigotas ligeramente deficientes, a condición de que la fluorescencia disminuida sea distinguida como una categoría aparte. La FST seguirá teniendo un papel importante en la detección de la deficiencia de G6PD en vista de su eficacia diagnóstica, relativamente buena, junto con su facilidad de uso y bajo costo. La deficiencia de glucosa-6-fosfato deshidrogenasa es el defecto enzimático humano más común, presente en más de 400 millones de personas de todo el mundo. Este trastorno hereditario ligado al cromosoma X afecta más comúnmente a personas de ascendencia africana, de Asia Oriental, el Mediterráneo o de Oriente Medio. El estudio fue publicado en la edición de octubre de 2011 de la revista International Journal of Laboratory Hematology.

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University Malaya

R&D Diagnostics

Corbett Research