Análisis de sangre aumenta exactitud en examen prenatal

Un análisis de sangre simple, exacto y de bajo riesgo, puede detectar el grupo de sangre fetal, el género y las condiciones genéticas en fetos; la prueba de ADN es barata y no es invasiva, a diferencia de la prueba de amniocentesis tradicional que consiste en una aguja y conlleva un riesgo menor de aborto espontáneo.

Se han evaluado métodos de laboratorio para la genotipificación no invasiva del grupo RHD fetal (grupo sanguíneo Rh, antígeno D) que puede evitar la administración innecesaria, profiláctica de anti-D a las mujeres portadoras de fetos RHD-negativos. La prueba desarrollada puede llevarse a cabo en las madres en situación de riesgo de enfermedades genéticas recesivas ligadas al cromosoma X, incluyendo la hemofilia y la distrofia muscular de Duchenne y en las madres en situación de riesgo de enfermedad hemolítica del recién nacido.

Científicos de la Universidad de Plymouth (Reino Unido) reclutaron mujeres embarazadas (de gestación de 28 a 30 semanas), RHD-negativas, todas las cuales cumplían con los criterios de inclusión, a partir de noviembre de 2013 y hasta septiembre de 2014. Se recolectaron veintidós muestras de sangre periférica materna en tubos con ácido etilendiaminotetraacético (EDTA) y se centrifugaron a 1600 × g durante 10 minutos a temperatura ambiente (muestras 1-22). El plasma fue retirado cuidadosamente y transferido a un tubo de 15 mL. Posteriormente, el plasma fue re-centrifugado a 16.000 × g durante 10 minutos.

Veinticuatro muestras de sangre materna recogidas en los tubos de recolección de sangre para ADN libre de células, Streck (BCT Streck, La Vista, NE, EUA) fueron centrifugados a 1600 × g, durante 15 minutos a temperatura ambiente (muestras 23-46 ). El plasma se retiró cuidadosamente, se transfirió a un tubo de 50 ml, y se re-centrifugó a 2500 × g durante 10 minutos. Se extrajo el ADN de dos alícuotas de 1 ml de plasma y las muestras fueron cuantificadas en el Fluorómetro Qubit 2.0 (Thermo Fisher; Waltham, MA, EUA). Usando objetivos Y-específicos y RHD-específicos, el equipo investigó la variación en lafracción de ADN fetal libre de células (cffADN) y se determinó la sensibilidad alcanzada para muestras óptimas y subóptimas con una reacción en cadena de la polimerasa novedosa de Gotita Digital (ddPCR, Bio-Rad Laboratories; Hércules CA, EUA) en comparación con la PCR cuantitativa en tiempo real (qPCR).

La fracción cffADNera significativamente mayor en las muestras recogidas en los BCTs Streck en comparación con las muestras recogidas en tubos con EDTA. En las muestras que expresaron las fracciones óptimas de cffADN mayores que 4%, tanto la qPCR como la ddPCR mostraron 100% de sensibilidad en los ensayos para la proteína-testículo específica, Y ligado 1 (TSPY1) y el exón 7 RHD RHD7). Aunque la ddPCR también tenía 100% de sensibilidad para el exón 5 RHD (RHD5), la qPCR tenía una sensibilidad reducida (83%) para este objetivo. Para las muestras que expresaban fracciones subóptimas de cffADN(menos de 2%), la ddPCR logró 100% de sensibilidad para todos los ensayos, mientras que la qPCR logró el 100% de sensibilidad sólo para el ensayo objetivo multicopia TSPY1.

Neil D. Avent, PhD, profesor y autor principal del estudio, dijo: “A pesar de que la determinación de los grupos en la sangre fetal y el género utilizando sangre materna se ha hecho durante más de una década, este estudio demuestra un método mucho más exacto y sensible para la detección de ADN fetal . Esto ofrece grandes oportunidades para detectar otras condiciones utilizando esta técnica, pero es mucho más barato que los métodos no invasivos actuales. Se puede ver el final de las técnicas invasivas de la amniocentesis y el muestreo de la vellosidades coriónicas”. El estudio fue publicado en la edición de noviembre de 2015 de la revista Clinical Chemistry.

Enlaces relacionados:

University of Plymouth
Streck
Thermo Fisher
Bio-Rad Laboratories