Utilizamos cookies para comprender de qué manera utiliza nuestro sitio y para mejorar su experiencia. Esto incluye personalizar el contenido y la publicidad. Para más información, Haga clic. Si continua usando nuestro sitio, consideraremos que acepta que utilicemos cookies. Política de cookies.

Please note that the LabMedica website is also available in a complete English version
Presenta Sitios para socios Información LinkXpress
Ingresar
Publique su anuncio con nosotros
Sysmex America, Inc.

Deascargar La Aplicación Móvil




Eventos

01 mar 2020 - 05 mar 2020
05 mar 2020 - 07 mar 2020
11 mar 2020 - 13 mar 2020

Estandarizada la citometría de flujo para predecir el rechazo a los trasplantes

Por el equipo editorial de LabMedica en español
Actualizado el 18 Jun 2019
Print article
Imagen: El analizador de células LSRFortessa ofrece la mejor opción para la citometría de flujo, proporcionando potencia, desempeño y consistencia (Fotografía cortesía de BD Biosciences).
Imagen: El analizador de células LSRFortessa ofrece la mejor opción para la citometría de flujo, proporcionando potencia, desempeño y consistencia (Fotografía cortesía de BD Biosciences).
Comprender el fenotipo inmunológico de los receptores de trasplantes con inmunosupresión estándar, terapias con células inmunitarias y nuevos tratamientos farmacológicos es esencial para mejorar los resultados de los trasplantes.

La monitorización inmunológica mediante citometría de flujo de varios colores es una herramienta muy útil para evaluar la respuesta inmunitaria en el trasplante y tiene el potencial de arrojar una idea de los mecanismos responsables de un tratamiento exitoso. El trasplante de islotes es una terapia de vanguardia para la diabetes tipo 1 con un éxito notable en pacientes hipoglucémicos, donde las células beta pancreáticas de un donante se trasplantan a un receptor, permitiendo al cuerpo producir insulina y regular el azúcar en la sangre.

Científicos del Instituto Westmead para la Investigación Médica (Sídney, Australia) y sus asociados, reclutaron a ocho individuos sanos y 13 pacientes con diabetes tipo 1 (DT1), incluidos cuatro receptores de trasplantes de islotes inscritos en trasplantes de islotes y se recolectó sangre total periférica (STP).

El equipo utilizó 46 anticuerpos antihumanos conjugados con fluorocromo para los paneles finalizados. Todos los anticuerpos fueron suministrados por BD Biosciences (La Jolla, CA, EUA), excepto CD303 y CCR7 (CD197), que se obtuvieron de otros fabricantes. Se probaron 21 anticuerpos adicionales para ciertos antígenos de clones múltiples y/o fluorocromo.

Los 43 anticuerpos individuales se valoraron utilizando sangre total periférica anticoagulada de los individuos control sanos con 5-6 diluciones en serie de los anticuerpos. Las titulaciones de anticuerpos para CD137 (4-1BB) y CD154 se realizaron en células mononucleares de sangre periférica (PBMC) que se estimularon con perlas CD3/CD28 activadoras de T (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, EUA) durante la noche a una dilución 1:10. El diseño del panel se basó en el brillo del fluorocromo, la densidad del antígeno y la coexpresión, el desbordamiento del fluorocromo de los subconjuntos de células inmunitarias de interésy la disponibilidad de reactivos en cada panel para los cinco parámetros BD-LSR Fortessa de BD Biosciences.

Se estandarizaron los procedimientos operativos, que incluyen la recolección de muestras, los cócteles de anticuerpos, el protocolo de coloración, la configuración del citómetro de flujo y el análisis de datos. Se calculó el índice de coloración de 43 anticuerpos y la matriz de propagación de desbordamiento para cada panel. Las concentraciones finales para los 46 anticuerpos utilizados se determinaron para la coloración de muestras de sangre total periférica. Se diseñaron y establecieron en el BD-LSRFortessa de cinco láseres el recuento de células absoluto y siete paneles de perfiles de leucocitos que consisten en subconjuntos y/o estados de granulocitos, monocitos, células dendríticas, B, NK y T, incluidas las células T reguladoras (Treg) y las NKT. Se estableció la capacidad para medir de forma reproducible los subconjuntos inmunitarios y los perfiles inmunitarios de los pacientes con trasplante de islotes hasta 18 meses después del trasplante como una herramienta para medir la reconstitución de las células inmunitarias después del trasplante.

Los autores concluyeron que estandarizaron los procedimientos operativos, la configuración del instrumento y el análisis de datos para el recuento absoluto de células inmunitarias y siete paneles multicolores de leucocitos utilizando 12 parámetros de un citómetro de flujo de cinco láseres. Los ajustes permiten una identificación clara de múltiples subconjuntos de leucocitos, incluso cuando están presentes en baja frecuencia en la sangre periférica. Demostraron la utilidad de los procedimientos para realizar evaluaciones longitudinales en pacientes con trasplante de islotes y tiene el potencial para monitorizar a los pacientes con trasplante y otros pacientes con inmunosupresión a largo plazo y para determinar si algún cambio en los subconjuntos de leucocitos se puede asociar con los resultados. El estudio fue publicado el 22 de mayo de 2019 en la revista PLOS ONE.

Enlace relacionado:
Instituto Westmead para la Investigación Médica
BD Biosciences
Thermos Fisher Scientific




Print article

Canales

Química Clínica

ver canal
Imagen: El suero de pacientes con o con mayor riesgo de diabetes tipo 1 a menudo posee anticuerpos que reaccionan con el citoplasma de las células de los islotes pancreáticos, un fenómeno que se determina mediante pruebas de inmunofluorescencia indirecta de muestras de suero con páncreas humano del grupo sanguíneo O (Fotografía cortesía de la Asociación Americana de Diabetes).

Estudio de los autoanticuerpos contra los islotes revela el riesgo de diabetes tipo 1 pediátrica

La diabetes tipo 1 (DT1) es un trastorno autoinmune, progresivo, crónico con susceptibilidad poligénica compleja, generalmente asociada con ciertos alelos HLA (locus IDDM1). La progresión a DT1 suele estar... Más

Diagnóstico Molecular

ver canal
Imagen: Histopatología del adenocarcinoma de pulmón (Fotografía cortesía de Nikon).

Características genómicas en el adenocarcinoma de pulmón difieren entre los asiáticos orientales, europeos

El adenocarcinoma de pulmón es un subtipo de cáncer de pulmón de células no microcíticas (CPNM). El adenocarcinoma de pulmón se clasifica como tal por el aspecto de las células cancerosas bajo un microscopio.... Más

Hematología

ver canal
Imagen: El kit VisuLize Factor XI ELISA es un inmunoensayo enzimático para la determinación cuantitativa del factor XI en muestras de plasma humano utilizando el ensayo de inmunoabsorción de doble anticuerpo ligado a enzimas (ELISA) (Fotografía cortesía de Affinity Biologicals, Inc).

Examinan la incidencia del inhibidor contra el factor IX en la hemofilia B pediátrica

La hemofilia B es un trastorno de la coagulación de la sangre que causa hematomas y hemorragias fáciles debido a una mutación hereditaria del gen para el factor IX, y que resulta en una deficiencia del factor IX.... Más

Patología

ver canal
Imagen: Flujo de trabajo de los análisis personalizados de cáncer mediante análisis de ADN tumoral circulante (ADNc) de secuenciación profunda (CAPP-Seq) (Fotografía cortesía de Rashedul Islam Rony, PhD).

Biopsia líquida de cáncer de pulmón guía la terapia adyuvante para la ERM

La enfermedad residual mínima (ERM) es el nombre dado a un pequeño número de células leucémicas (células cancerosas de la médula ósea) que permanecen en la persona durante el tratamiento o después del... Más

Tecnología de Lab

ver canal
Imagen: Esquema de una serie de nanotubos decorados con nanopartículas de oro que capturan moléculas virales para la espectroscopía Raman in situ con el fin de realizar identificación óptica de virus sin necesidad de etiquetas (Fotografía cortesía del profesor Mauricio Terrones)

Dispositivo rápido y económico captura e identifica virus

Actualmente, los virólogos estiman que en los animales se encuentran 1,67 millones de virus desconocidos, algunos de los cuales pueden ser transmitidos a los humanos. Los virus conocidos, como el H5N1,... Más

Industria

ver canal
Imagen: En 2019, se espera que los diagnósticos de laboratorio en un chip/microfluídicos crezcan al ritmo más rápido de TCAC, debido a su capacidad para reducir los procesos de laboratorio completos a un solo chip y acelerar el proceso de diagnóstico de enfermedades con resultados cuantitativos de alta precisión (Fotografía cortesía de Fotolia).

Mercado mundial de inmunoanálisis microfluidos llegará a los dos mil millones de dólares en 2025

Se espera que el mercado global de inmunoanálisis microfluídico crezca a una tasa anual compuesta del 12,7% desde 2019, a dos mil millones de dólares para 2025, impulsado por los mayores beneficios ofrecidos... Más
Copyright © 2000-2020 Globetech Media. All rights reserved.