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06 feb 2023 - 09 feb 2023

Supresor tumoral en la poliposis adenomatosa coli regula la migración de linfocitos T

Por el equipo editorial de LabMedica en español
Actualizado el 28 Apr 2022
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Imagen: El contador de células de fluorescencia doble LUNA-FL (Fotografía cortesía de Logos Biosystems)
Imagen: El contador de células de fluorescencia doble LUNA-FL (Fotografía cortesía de Logos Biosystems)

La poliposis adenomatosa familiar (PAF) es una enfermedad hereditaria autosómica dominante que a menudo resulta de mutaciones de la línea germinal en el gen de la poliposis adenomatosa coli (APC), un supresor de tumores y regulador de la polaridad. La proteína APC regula la vía de señalización de Wnt/β-catenina como componente del complejo de destrucción de β-catenina.

El papel clave de la inmunidad en el carcinoma colorrectal humano fue subrayado por la correlación entre el tipo y la frecuencia de linfocitos T infiltrantes y el pronóstico favorable del paciente. Una vez activados en los ganglios linfáticos, los linfocitos pasan por la recirculación del torrente sanguíneo y la migración transendotelial dependiente de la adhesión para finalmente invadir los tejidos tumorales, donde ejecutan sus funciones efectoras para eliminar las células tumorales.

Un biólogo celular del Institut Pasteur (París, Francia) y sus colegas, reclutaron a siete pacientes con PAF y sus respectivos donantes sanos de sexo, edad y etnia compatibles. Se purificaron células mononucleares de sangre periférica de pacientes con PAF o de donantes sanos mediante centrifugación con Ficoll-Hypaque y se activaron. Los recuentos celulares, la viabilidad y el tamaño se evaluaron cada dos días (hasta el día 12) con un contador celular de fluorescencia dual LUNA-FL, después de colorear las células con una mezcla de naranja de acridina/yoduro de propidio (Logos Biosystems, Villeneuve d'Ascq, Francia).

En el día 5, se purificaron las células T CD4 mediante clasificación magnética positiva (Miltenyi Biotec, Bergisch Gladbach, Alemania) y se recuperaron las células T CD8 de la población no retenida. Otros procedimientos realizados incluyeron transfecciones de siARN, estudios de quimiotaxis, migración en microcanales, migración celular en matrices de colágeno 3D, migración celular en matrices de colágeno 3D, microscopía fluorescente con imágenes adquiridas con un microscopio confocal LSM700 (Carl Zeiss, Oberkochen, Alemania).

Los investigadores revelaron que las células T de pacientes con PAF, que portan mutaciones en APC muestran una adhesión y motilidad deterioradas en entornos restringidos. Además, diseccionaron los mecanismos celulares que sustentan estos defectos en la línea de células T CEM, empobrecidas en APC, que recapitulan el fenotipo observado en las células T PAF. Descubrieron que APC afecta la motilidad de las células T al modular la adhesión dependiente de integrinas y la reorganización del citoesqueleto. Por lo tanto, las mutaciones de APC en pacientes con PAF no solo provocan neoplasias intestinales, sino que también afectan la migración de células T, lo que podría contribuir a una inmunidad antitumoral ineficiente.

Marta Mastrogiovanni, candidata a MSc, PhD y autora principal del estudio, dijo: “Para moverse a lo largo de las paredes de los vasos sanguíneos, cruzarlos y llegar al tumor para infiltrarse, los linfocitos sanos cambian su morfología. Algo parecido a un gran pie adhesivo, sostenido por el citoesqueleto de los linfocitos, se alarga en la dirección de la migración. Esta polarización es esencial para el movimiento en la dirección correcta. En los linfocitos mutados, los microtúbulos que forman el citoesqueleto están desorganizados y hay menos proteínas de adhesión. Las células pierden su polaridad y sus ‘músculos’”.

Los autores concluyeron que sus datos proporcionan la primera evidencia de que la APC orquesta el acoplamiento de las fuerzas mediadas por el citoesqueleto y la adhesión dependiente de integrina necesaria para la migración de células T como ocurre fisiológicamente a través de las barreras endoteliales, los órganos linfoides, el tejido inflamado y los tumores. En consecuencia, los defectos de APC pueden afectar la vigilancia inmunológica y las funciones efectoras de las células T, favoreciendo así la tumorigénesis iniciada por defectos en la diferenciación de células epiteliales en pacientes con PAF. El estudio fue publicado el 13 de abril de 2022 en la revista Science Advances

Enlaces relacionados:
Institut Pasteur
Logos Biosystems
Miltenyi Biotec
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