Prueba molecular busca bacterias resistentes a medicamentos

Una prueba desarrollada en el laboratorio que combina un caldo de enriquecimiento y una reacción en cadena de la polimerasa (rt-PCR) puede buscar los enterococos resistentes a la vancomicina (ERV).

El ensayo de rt-PCR, desarrollado específicamente para la detección del ERV y conocido como Ensayo de Laboratorio, fue evaluado y comparado con un kit comercial para la detección del ERV.

Microbiólogos en el Instituto Karolinska (Estocolmo, Suecia) investigaron 1.765 hisopados rectales o fecales, enviados al laboratorio para la detección de ERV, estudiados, en paralelo, mediante el Ensayo de Laboratorio y el kit Roche LightCycler VRE. Dos cepas probadas de Enterococcus faecium y 52 aislados clínicos de ERV, bien caracterizados, de diferentes clones fueron evaluados en el estudio. La PCR, en tiempo real, se realizó para la detección de los genes VanA y VanB.

Los valores diagnósticos para el Ensayo de Laboratorio fueron los siguientes: 100% de sensibilidad, especificidad 79,92%, 1,94% de valor predictivo positivo y 100% de valor predictivo negativo, comparables a los resultados del análisis con el kit basada en el LightCycler. El límite de detección del Ensayo de Laboratorio fue de 100 a 101 unidades formadoras de colonias (UFC)/mL de inóculo en caldo, para tanto los ERV VanA y VanB. La técnica desarrollada en el estudio fue aprobado para su aplicación en el Sistema Applied Biosystems 7500 Fast de PCR en tiempo real (Applied Biosystems, Foster City, California, EUA) y el Sistema LightCycler 480 PCR en tiempo real (Roche Diagnostics GmbH, Mannheim, Alemania).

Los autores concluyeron que la flexibilidad en la elección de sistema de PCR hace posible que el ensayo de PCR pueda ser totalmente compatible con la plataforma de extracción de ADN, proporcionando un flujo de trabajo integrado. Por otra parte, respecto al costo, se ahorran 10 dólares, por muestra, cuando el Ensayo de Laboratorio sustituye el kit comercial para la detección de rutina del ERV. Por lo tanto, el método desarrollado en el de PCR en caldo es un ensayo eficaz y económico para la detección del ERV. El estudio fue publicado en marzo de 2012 en la revista European Journal of Clinical Microbiology & Infectious Diseases.

Enlaces relacionados:

Karolinska Institute

Applied Biosystems

Roche Diagnostics GmbH