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Leucemia linfoide crónica aumenta las células madre hematopoyéticas en la sangre periférica

Por el equipo editorial de LabMedica en español
Actualizado el 28 Dec 2020
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Imagen: STEMvision: Recuento de colonias automatizado y estandarizado para el análisis de unidades formadoras de colonias hematopoyéticas (UFC) (Fotografía cortesía de STEMCELL Technologies).
Imagen: STEMvision: Recuento de colonias automatizado y estandarizado para el análisis de unidades formadoras de colonias hematopoyéticas (UFC) (Fotografía cortesía de STEMCELL Technologies).
La leucemia linfoide crónica (LLC) es una neoplasia maligna indolente de células B que invariablemente se infiltra en la médula ósea. La enfermedad es incurable y, tras la aparición de la terapia, los pacientes resistentes a la enfermedad sucumben a infecciones debido a una insuficiencia secundaria de la médula ósea.

Los mecanismos subyacentes que alteran la hematopoyesis normal en pacientes con LLC están mal definidos. Las células B maduras diferenciadas, ya sea pre o post centro germinal, se consideran la célula de origen de la LLC mutada y no mutada, respectivamente. Sin embargo, este paradigma ha sido desafiado en base a la observación de mutaciones recurrentes de LLC presentes en una fracción de células madre hematopoyéticas (HSC).

Los hematólogos del Instituto de Células Madre MRC Cambridge (Cambridge, Reino Unido) y sus colegas, evaluaron la frecuencia de las células madre y progenitoras hematopoyéticas (HSPC) en la sangre periférica (SP) de 69 pacientes individuales con el diagnóstico de LLC y 21 controles sanos de la misma edad. Las muestras de SP se recolectaron por la tarde, cuando se sabe que la circulación de los progenitores hematopoyéticos alcanza su punto máximo debido a la oscilación circadiana.

Para evaluar el número absoluto de células CD34+, se colorearon células mononucleares no purificadas obtenidas de 5 mL de SP y se seleccionaron para la positividad de CD34 y la negatividad de CD19 con el fin de cuantificar la cantidad total de células progenitoras hematopoyéticas circulantes, utilizando perlas de recuento de precisión (Biolegend, San Diego , CA, EUA) y citometría de flujo. Las frecuencias relativas de subconjuntos de HSPC se evaluaron en células enriquecidas con CD34+, utilizando perlas (Miltenyi Biotec, Bergisch Gladbach, Alemania).

Para evaluar la capacidad de diferenciación de las HSPC, se sembraron en placas 1 x 103 o 6 x 103 células CD34+ por duplicado en metilcelulosa semisólida completa (STEMCELL Technologies, Vancouver, BC, Canadá). Las colonias diferenciadas se contaron y puntuaron con base en la morfología observada 14 días después del cultivo en un ambiente húmedo a 37°C usando la cámara y el software STEMVision de STEMCELL Technologies.

Los investigadores informaron los números absolutos de HSPC circulantes y encontraron un número similar de células CD34+ en los individuos sanos de la misma edad. Los análisis revelaron que los progenitores mieloides y mieloeritroides comunes (CMP-MEP) (CD19−CD34+CD38+CD45RA−CD10−CD7−) eran más abundantes en la SP de los pacientes con LLC. Por el contrario, los progenitores mielolinfoides (CD19−CD34+CD38−CD45RA+) disminuyeron significativamente en la sangre de los pacientes en comparación con los controles sanos. Se sabe que el grupo de HSC (CD19−CD34+CD38−CD45RA−), definido como un grupo de HSC y progenitores multipotentes, contiene un grupo heterogéneo de células con diferentes capacidades de autorrenovación y diferenciación, y también fue más abundante en la sangre de los pacientes.

Los autores concluyeron que sus datos proporcionan más información sobre los mecanismos que causan la citopenia en pacientes con LLC y sugieren que una movilización patológica de ST-HSC es un factor contribuyente. El estudio fue publicado el 18 de diciembre de 2020 en la revista Blood Advances.

Enlace relacionado:
Instituto de Células Madre MRC
Biolegend
STEMCELL Technologies

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