Desarrollan genotipificación multiplex para tipos sanguíneos raros

Se ha desarrollado una reacción en cadena de la polimerasa, combinada con la agrupación de ADN, para la detección en masa de los tipos sanguíneos raros.

Todos los análisis existentes de reacción en cadena de la polimerasa con cebadores específicos de secuencia (PCR-SSP), para la tipificación sanguínea, genotipifican uno o varios polimorfismos nucleótidos únicos (SNP), pero la agrupación de ADN es una forma para reducir la cantidad de genotipificación requerida.

Los científicos del Hemocentro Shanghái (China) establecieron un análisis multiplex PCR-SSP, sensible, para el análisis del ADN combinado, con el fin de detectar los alelos raros Fyb y S. Fue aplicado para examinar un total de 4.490 muestras de donantes a través de pruebas de 898 agrupaciones de ADN. Las muestras en los conjuntos positivos fueron analizadas individualmente. El ADN genómico fue extraído de muestras de sangre anticoaguladas con etilendiaminotetraacetato (EDTA) utilizando el kit genómico TIANamp ADN (Tiangen Biotech; Beijing, China). Cada cinco muestras de ADN, de los 4.490 donantes examinados, fue agrupada antes de la PCR el multiplex.

Doscientos cincuenta y cuatro donantes dieron positivo para el alelo Duffy Fyb, mientras que 101 donantes fueron positivos para el alelo S. Entre los 254 donantes Fy(b+), cinco eran Fy(a-b+) y 249 eran Fy (a+b+). Entre los 101 donantes S+, tres fueron de S+s- y 98, S+s+. Los alelos raros Fyb y S, comprendieron el 2,28% y 1,16% respectivamente. Los ensayos de PCR-SSP fueron confirmados por análisis de secuenciación y pruebas serológicas.

Los autores concluyeron que esta detección genética de alta eficiencia proporciona un medio de detectar un número relativamente grande de donantes, a la vez que proporciona, en cierta medida, sangre antígeno-negativa para los pacientes con anticuerpos raros. El ensayo de PCR múltiplex fue combinado con la agrupación de ADN de para reducir el número de pruebas requeridas, haciendo que la detección, en gran escala, sea viable y una estrategia eficaz y económica. El estudio fue publicado, el 22 de enero de 2013, en la revista Transfusion Medicine.


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Tiangen Biotech