Desarrollan técnica de tipificación molecular de grupos sanguíneos

Se ha diseñado un nuevo sistema para la tipificación molecular de los grupos sanguíneos que les ofrece a los bancos de sangre la posibilidad de estudiar extensamente a los donantes de sangre con un costo relativamente bajo.

Aunque la transfusión de sangre es generalmente segura, de vez en cuando la aloinmunización, que es cuando se forma un anticuerpo en respuesta a un antígeno que no está presente en los propios glóbulos rojos de la sangre de una persona (GR), sigue siendo una complicación temida, particularmente en pacientes con enfermedad de células falciformes.

Los científicos en el Etablissement Français du Sang Pyrénées Méditerranée (La Plaine Saint-Denis, Francia) desarrollaron una nueva plataforma flexible de microarrays de ADN para la tipificación molecular de los grupos sanguíneos. Esto incluye dos estaciones de trabajo robóticas que permiten el procesamiento de la muestra de sangre para determinar el genotipo. Un estudio piloto muestra resultados prometedores para responder a los requerimientos de los laboratorios para poder hacer el cribado simple y de bajo costo de los donantes de sangre.

Un total de 1.132 muestras de sangre anticoagulada provenían de donantes escogidos al azar, en su mayoría de raza blanca, a los que se les determinó el fenotipo usando técnicas serológicas estándar de hemaglutinación. Se utilizaron ciento setenta y dos muestras para determinar los criterios de puntuación para predecir el fenotipo. Las 960 muestras restantes fueron utilizadas para la validación del sistema de 96 pozos de microarrays de ADN.

La extracción de ADN genómico de muestras de sangre total fue realizada utilizando un sistema MagNA Pure 96 (Roche Diagnostics, Rotkreuz, Suiza) y el Kit de Volúmenes Pequeños de NA Viral de Roche en una placa de microarrays de 96 pozos. Después de la extracción, el ADN fue eluído y cuantificado usando un espectrofotómetro NanoVue (GE Healthcare, Little Chalfont, Reino Unido).

Se consideraron un total de 938 muestras como válidas y se asignaron genotipos con base en los criterios de puntuación determinados para los ocho polimorfismos de un solo nucleótido (SNP). Los fenotipos predichos a partir de los genotipos fueron comparados con los obtenidos por la tipificación serológica. La tasa de concordancia entre los ensayos de hemaglutinación estándar y los procesados utilizando el ADN fue alta para los cuatro sistemas de grupos sanguíneos. Sólo tres fenotipos predichos en que estaban involucrados los sistemas KEL, JK, y MNS fueron discordantes. Esta versión permite los ensayos múltiplex simultáneos de hasta 96 muestras en una sola reacción de procesamiento, pero el sistema permite otros formatos de microarrays de ADN con un número menor de pozos que se pueden adaptar y transformar fácilmente en esta plataforma.

Jean-Charles Brès, PhD, el investigador principal, dijo: “La disponibilidad de genotipificación de los sanguíneos, de alto rendimiento, basada en el ADN sería una gran ayuda para la medicina transfusional. Además de proporcionar hematíes completamente concordantes con los antígenos y permitir una mejor identificación de los tipos de sangre de donantes raros, esta tecnología reducirá las reacciones adversas y disminuirá el costo relativo del análisis”. El costo sería de menos de 2,60 dólares por SNP. El estudio fue publicado en la edición de mayo 2014 de la revista Journal of Molecular Diagnostics.


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Etablissement Français du Sang Pyrénées Méditerranée
Roche Diagnostics
GE Healthcare