Desarrollan prueba rápida en saliva para virus Zika

La identificación temprana de patógenos es necesaria para combatir la propagación de epidemias emergentes y reemergentes. El diagnóstico se puede lograr con una plataforma genérica y un protocolo diseñado para identificar cualquier patógeno mediante la detección del ácido nucleico del patógeno una vez que se determina su secuencia y se identifica su huella antigénica.

La muestra usada con mayor frecuencia para detectar el virus del Zika (ZIKV) es la sangre y generalmente esta se procesa utilizando una técnica de diagnóstico común llamada reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real (RT-PCR). Sin embargo, la sangre puede no ser el mejor fluido ya que el virus desaparece de la sangre una o dos semanas después de que una persona se infecta; puede persistir más tiempo en la saliva, el semen y la orina.

Científicos de la Facultad de Odontología de la Universidad de Nueva York (Nueva York, NY, EUA) y sus colegas desarrollaron una prueba rápida de Zika que combina la determinación del ácido nucleico y de los anticuerpos en la saliva, dado que el virus del Zika y los anticuerpos persisten en la saliva. Una prueba de saliva también es no invasiva, rentable y más fácil de recolectar que la sangre o la orina. El equipo optimizó primero el ensayo de amplificación isotérmica mediada por bucle de transcripción inversa (RT-LAMP) para detectar el ARN del ZIKV utilizando un dispositivo de amplificación isotérmica de mesa y luego adaptó el ensayo al dispositivo microfluídico de cartucho CARD (Rheonix, Ithaca, NY, EUA).

El cartucho microfluídico Rheonix CARD es un casete integrado que puede proporcionar un resultado tanto inmunológico como de ácido nucleico (RT-LAMP) a partir de una única muestra. Incorpora todas las bombas, válvulas, microcanales, reacciones y depósitos de reactivos en un cartucho desechable. El procesamiento y análisis en el cartucho Rheonix CARD es controlado por la estación de trabajo Encompass Optimum, desarrollada para proporcionar un control automatizado de todas las funciones de preparación de muestras.

El ensayo en un dispositivo microfluídico permitirá analizar 24 muestras de manera simultánea y automática desde la introducción de la muestra hasta la detección mediante la técnica inversa de detección de punto por punto (RDB). Los datos preliminares utilizando muestras de saliva enriquecidas con ZIKV mostraron que el sistema de diagnóstico detecta el ARN de ZIKV en la saliva. El límite de detección del ensayo RT-LAMP en el instrumento Genie III (OptiGene, Horsham, Reino Unido) y los cartuchos Rheonix CARD es similar a otros resultados informados utilizando RT-LAMP y otros ensayos isotérmicos. El estudio fue publicado el 5 de febrero de 2018 en la revista Public Library of Science ONE.